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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 细胞在激光照射损伤后，荧光寿命变短，求解？
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kelly926

铜虫 (初入文坛)

[求助] 细胞在激光照射损伤后，荧光寿命变短，求解？

在使用荧光寿命成像设备进行成像的过程中，由于激光能量过高，造成细胞损伤。
发现得到的图像结果显示，细胞内的荧光寿命变短了。
请各位给我讲讲是什么原因造成的？谢谢。
后附图。
图一为细胞在低剂量激光照射下的成像照片，细胞的荧光寿命分布在1000ps以上，
图二为激光能量过高造成细胞破损的照片，细胞荧光寿命分布在红色区域，寿命较短。
细胞在激光照射损伤后，荧光寿命变短，求解？
图片1.png


细胞在激光照射损伤后，荧光寿命变短，求解？-1
图片2.png
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1楼 2013-07-25 10:20:20
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easonchao

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-07-26 10:30:20
首先，你说的荧光寿命应该不是细胞而是是细胞内自发荧光或者是你做了标记物的荧光
其次，激光打穿细胞后你确定细胞非可逆破损了，还是瞬间破损又复原？
不知道你具体做的什么实验，不过提供一种可能作参考：就是标记在细胞内的荧光物质有没有可能在高功率脉冲光作用下脱离了细胞内部后失活不再出现荧光，而本身细胞内部的存在的自发荧光团寿命相对较短，这时候就表现出来了，因为可以从下面那个图看到你的不同细胞亚结构的荧光寿命明显不同
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http://c.hiphotos.baidu.com/album/s%3D1400%3Bq%3D90/sign=441b71ba0c33874498c52b78613fe288/c9fcc3cec3fdfc03207acc52d43f8794a5c226dd.jpg?v=tbs
2楼2013-07-26 10:21:43
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kelly926

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by easonchao at 2013-07-26 10:21:43
首先，你说的荧光寿命应该不是细胞而是是细胞内自发荧光或者是你做了标记物的荧光
其次，激光打穿细胞后你确定细胞非可逆破损了，还是瞬间破损又复原？
不知道你具体做的什么实验，不过提供一种可能作参考：就是标 ...

谢谢楼上回复。
是细胞自体荧光的荧光寿命。 没有标记荧光物质。
激光打穿后彻底破损了。细胞膜完全破裂。

下面那个图主要看蓝色十字架标记的那个细胞。下面细胞里面有蓝色伪彩的那个细胞先忽略不计。

细胞周围的环境发生变化有没有可能影响细胞的荧光寿命。
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3楼2013-07-26 15:53:20
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easonchao

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by kelly926 at 2013-07-26 15:53:20
谢谢楼上回复。
是细胞自体荧光的荧光寿命。 没有标记荧光物质。
激光打穿后彻底破损了。细胞膜完全破裂。

下面那个图主要看蓝色十字架标记的那个细胞。下面细胞里面有蓝色伪彩的那个细胞先忽略不计。

细胞 ...

楼主为什么不做几组比对试验
列出可能影响的因素
看看到底影响是哪个因素更有决定性呢？
其实我也没做过飞秒打细胞看荧光寿命的实验
以上也是个人看法而已
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http://c.hiphotos.baidu.com/album/s%3D1400%3Bq%3D90/sign=441b71ba0c33874498c52b78613fe288/c9fcc3cec3fdfc03207acc52d43f8794a5c226dd.jpg?v=tbs
4楼2013-07-26 20:35:12
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kelly926

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by easonchao at 2013-07-26 20:35:12
楼主为什么不做几组比对试验
列出可能影响的因素
看看到底影响是哪个因素更有决定性呢？
其实我也没做过飞秒打细胞看荧光寿命的实验
以上也是个人看法而已...

嗯，实验有很多组。因为我本身不是很懂生物。不知道是不是细胞本身性质发生了改变才引起荧光寿命的变化。物理上解释我想可能是温度改变了，还希望找到其他的解释。
谢谢
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5楼2013-07-27 06:16:03
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mutationdna

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

荧光寿命用的是TCSPC和phase shift方法，如果是前者就能解释。
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6楼2013-08-02 16:29:55
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kelly926

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mutationdna at 2013-08-02 16:29:55
荧光寿命用的是TCSPC和phase shift方法，如果是前者就能解释。

tcspc，请问您有何建议？谢谢。
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7楼2013-08-05 16:12:38
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mutationdna

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1. 细胞破碎后，荧光物质的溶剂环境改变，荧光被淬灭或和其他物质发生能量转移，因而寿命缩短，例如trp残基在分子内就是长寿命，如果溶剂环境改变，使其移动到分子表面就是短寿命。
2. 激光功率太大，TCSPC会导致有效的单光子效率降低，光子更多在短寿命区堆积。
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8楼2013-08-06 12:23:23
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