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凉皮

铜虫 (初入文坛)

[求助] Cy3探针标记引物3‘端怎么设计呢？是为了做EMSA（gel-shift）的

现在要做EMSA，欲找到与目的基因结合的蛋白，初始的一步Cy3标记的探针已确定要在3’端，可是不知道怎么设计这个引物,不知道是不是有现成的Cy3的序列直接加在正常目的引物的3‘端去合成，还是要怎么弄？看了别人的论文感觉有好几种序列？还想问你做EMSA的蛋白必须要有活性吗？因为后边还要挖掉滞后的蛋白去打质谱。EMSA的关键细节有哪些呢？本人是新手，望高手多多指教。

[ Last edited by silicare on 2014-2-26 at 16:33 ]
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1楼 2013-07-19 19:06:42
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alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
凉皮: 金币+7, ★★★很有帮助 2013-07-20 20:32:59
是的，根据你的需要，合成公司会给你合成5或者3端的，你只需要设计你的正常引物就可以 然后告诉他们哪一条的哪一端，introvigen就不错，主要我们这边比国内订购它们要便宜些
但是很贵，要很小心使用哦 呵呵
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修身、齐家、治国、平天下
3楼2013-07-20 18:42:42
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凉皮

铜虫 (初入文坛)
怎么都没人回复呢，自己顶一下了。
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2楼2013-07-20 16:44:26
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凉皮

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by alicelchf at 2013-07-20 18:42:42
是的，根据你的需要，合成公司会给你合成5或者3端的，你只需要设计你的正常引物就可以 然后告诉他们哪一条的哪一端，introvigen就不错，主要我们这边比国内订购它们要便宜些
但是很贵，要很小心使用哦 呵呵

谢谢楼上了，这是很贵的，一条一千多的呢。请问一般Cy3标记的探针保质期有多久呢？
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4楼2013-07-20 20:17:47
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alicelchf

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 凉皮 at 2013-07-20 20:17:47
谢谢楼上了，这是很贵的，一条一千多的呢。请问一般Cy3标记的探针保质期有多久呢？...

我觉得一个实验的周期它就够了，只要你保存避光得当，因为很快就用完或者结束试验了呢
半年吧 我都7个月都没问题
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修身、齐家、治国、平天下
5楼2013-07-20 20:27:45
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