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wangyiyi123

铁虫 (小有名气)

[求助] 用标准品分析,但未见色谱峰

如题,文献分析用于质谱分析。本人需要看看标准品在LC中能不能响应和考察色谱条件,做了以下实验。
80%乙腈水跑了60分钟,在3分钟前有个响应不高的峰,后面一直没有响应。
乙腈最终洗脱,但也没见任何峰。

文献中,15%乙腈到35%乙腈   0到20min
               35%到90%                   20到21min
               90%                              21到23min
               90%到15%                    23到24min
               15% 乙腈                      24到29min

出峰时间是 16 min
文献用的是reversed-phase Zorbax Extend-C18 2.1*150mm,5um
另,我用的是月旭C18 4.6*150mm,5um
按上面跑了一次,在换梯度的时候出现一大堆杂峰,在26min时候出现了一个小峰。

不知道是什么原因, 还望各位帮忙,万谢了!
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j115090587

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangyiyi123: 金币+1 2013-07-18 23:39:01
波长 浓度首先关注一下,按梯度跑有峰  可以适当调整一下梯度看看
2楼2013-07-17 17:05:33
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sjzhang156

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangyiyi123: 金币+1 2013-07-18 23:39:27
文献用质谱,你用液相,要先确定有没有液相信号啊,比如紫外还是荧光吸收的有没有?质谱只需要能带电荷就能分析,液相必须要有紫外吸收或者荧光特性才能分析。
3楼2013-07-17 17:05:37
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sklmp

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangyiyi123: 金币+1 2013-07-18 23:39:41
确认检测波长和标准品浓度是否有误
MH370
4楼2013-07-17 22:54:48
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wangyiyi123

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sjzhang156 at 2013-07-17 17:05:37
文献用质谱,你用液相,要先确定有没有液相信号啊,比如紫外还是荧光吸收的有没有?质谱只需要能带电荷就能分析,液相必须要有紫外吸收或者荧光特性才能分析。

我的标准也有紫外吸收
5楼2013-07-18 23:39:34
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lzk_1973

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangyiyi123: 金币+1 2013-07-22 09:54:24
你也用质谱做一下,看在哪出峰,质谱灵敏度高,有的物质用液相的检测器可能没不到,
另外你必须确保你的仪器平衡好了吗
6楼2013-07-19 10:58:07
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jgy2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wangyiyi123: 金币+2 2013-07-22 09:54:15
文献用的是reversed-phase Zorbax Extend-C18 2.1*150mm,5um
另,我用的是月旭C18 4.6*150mm,5um

你们色谱柱的内径不同,你的柱体积是文献上的5倍,要是文献16分钟,你的理论上也得七八十分钟
7楼2013-07-19 11:13:38
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sjzhang156

银虫 (著名写手)

这个文献梯度有问题,怎么会有机相比例一会变大一会又变小呢,直接从小比例有机相过渡到纯有机相,然后再用纯有机相保持几分钟,我觉得一般是会出峰的。另外不出峰还有个个可能是系统有污染,做样之前充分的冲洗并平衡色谱柱。
8楼2013-07-19 17:43:38
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wangyiyi123

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by sjzhang156 at 2013-07-19 17:43:38
这个文献梯度有问题,怎么会有机相比例一会变大一会又变小呢,直接从小比例有机相过渡到纯有机相,然后再用纯有机相保持几分钟,我觉得一般是会出峰的。另外不出峰还有个个可能是系统有污染,做样之前充分的冲洗并平 ...

怎样充分冲洗呢?谢谢~
9楼2013-07-22 09:55:35
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sjzhang156

银虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by wangyiyi123 at 2013-07-22 09:55:35
怎样充分冲洗呢?谢谢~...

和关机冲柱子一样,从水相多的流动相逐渐过渡到纯有机相,冲洗的时间长点。最好用梯度洗脱,多走几针,一针一个小时左右,把不同性质的污染物充分系脱下来。
10楼2013-07-22 15:32:26
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