24小时热门版块排行榜    

查看: 926  |  回复: 4
当前主题已经存档。

wxhy

木虫 (正式写手)

[交流] 菜虫的问题:关于细菌DNA提取

1.在提取细菌DNA时,5mL培养基离心得到的芽孢杆菌体加入2mL TE, 50mg/mL (4uL)溶菌酶之后,37度保温20分钟之后,总是有沉淀,而同时做的一株其他菌却非常的澄清。

请问,这究竟是什么原因?怎么解决?如果加大溶菌酶的量,或者保温的时间加长,一般是可以把沉淀溶解,这样是不是对基因组DNA有影响呢?
----------------------------------------

2.溶菌酶溶液,蛋白酶K溶液和RNsase溶液能在4度保存吗?能保存多久?



各位专家能否提供较为详细的经验和理论,我十分感激!

[ Last edited by asr on 2007-10-31 at 12:31 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

自然风

铁杆木虫 (知名作家)

I'm loving plantsoil


telomerase(金币+1,VIP+0):thanks!
芽孢杆菌是阳性菌,溶菌酶终浓度一般需要3mg/ml,可能是你的对照菌株是阴性菌,所以效果较好。

酶一般需要保存在—20度(还要避免反复冻融),4度保存很容易失活。
世事喧嚣,人生寂寞
2楼2007-10-31 19:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxhy

木虫 (正式写手)

溶菌酶终浓度一般需要3mg/ml,那么能告诉我保温的时间长短怎么确定吗?是否一定是等到完全澄清才算是比较好呢?
3楼2007-11-01 16:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingyu20071001

银虫 (小有名气)

有的阳性菌较难破壁,可以把多加点溶菌酶,对基因组影响应该并不太大,我提染色体的时候就是这样做的
4楼2007-11-01 21:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goses

金虫 (小有名气)

G+细胞壁都狂厚,代表菌就是金葡了,不过提DNA一般用不上溶菌酶。提质粒是必须用的,我加的5mg/ml,37度应该40-60m,每隔10分钟混悬一次。
溶菌酶最好是粉末存-20,现用现配,溶液存4度不能超过1周
自己不曾拥有,就快乐地欣赏别人的拥有,不让日子沦于黯淡,不让心绪隐于灰颓
5楼2007-11-05 15:23:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wxhy 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕306英一数二 +7 z1z2z3879 2026-03-16 9/450 2026-03-17 17:31 by ccjequ
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见