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heroyl

木虫 (正式写手)

[求助] 共转染293T细胞出现荧光，收集上清感染细胞后看不到荧光是怎么回事？

各位大侠：
你们好。小妹初做慢病毒实验这块，构建好PLL3.7-miRNA表达质粒后，同VSVG，REV和Prre三种质粒以2:1:1:1共转染293T细胞后，70%的细胞都可见荧光。转染24h后收集细胞上清，用滤膜过滤后和完全培养基按1:1感染CHO细胞24h后，看不到荧光，是不是意味着病毒没包装成功啊？怎样才能知道包装成完整病毒了呢？请各位大侠帮助！
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1楼 2013-07-16 13:16:38
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飞翔的丑小鸭

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wolfghost: 金币+1, 新虫回贴鼓励奖！ 2013-08-15 09:31:00
heroyl(liusir3836代发): 金币+2, 博学EPI+1, 你好！由于楼主长期未给予奖励，有版主代付金币2枚已表对应助者的鼓励！希望理解！ 2013-11-03 17:03:25
可以尝试一下培养时间长一些  72h再收集  看看效果会不会好点
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-25 16:45:40
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heroyl

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞翔的丑小鸭 at 2013-07-25 16:45:40
可以尝试一下培养时间长一些  72h再收集  看看效果会不会好点

现在转染是成功了，感染293T细胞还行，可是就是microRNA过表达不成功啊！急啊，折腾好久了……
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
3楼2013-09-23 12:37:05
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