24小时热门版块排行榜    

查看: 1271  |  回复: 10

jinanxmz

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC求助

提取分离新手,现在已经分到一定程度的样品跑HPLC
。。。
用MeOH和3%醋酸跑的,25%MeOH等度洗脱30min
3.5min和4.8min出两个峰 纵坐标才到4
TLC 365下有蓝色荧光一点 254看不到,硫酸显色泛黄。。。查帖子貌似是黄酮类??
       254有一点硫酸显偏黑色
现在不知道下一步怎么办了 怎么能让保留时间延长些呢
3.5min也太快了点吧。。。。。
我实验室没有专门提取分离的老师,完全摸瞎,毕业堪忧。。。
求前辈知道,新手木有金币,聊表心意啊。。。。。
HPLC求助
ピン2.jpg


HPLC求助-1
拼2.jpg
6:4:1没出来。。。

[ Last edited by jinanxmz on 2013-7-12 at 18:28 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你进样量是多少啊?为什么吸收那么弱?不会是你样品没跑出来吧?你冲柱时有峰没?
Domyallbesttohaveahappylife.
2楼2013-07-12 18:48:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglibo66

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢! 2013-07-16 00:12:37
增大流动相极性,减少甲醇的比例,如15%或20%的甲醇,保留时间就延长了。
3楼2013-07-13 08:10:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tony_young

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
增加水相比例~

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
4楼2013-07-13 08:44:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

redyna渊

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主什么柱子,C18么?要是C18肯定是大极性的物质,流动相极性要降下来的
5楼2013-07-13 22:16:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0shihongjuan

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢回复! 2013-07-16 00:12:50
进一针空白。对比一下。还有大概知道提取分离的是什么吧!进对照品看是不是所要峰别瞎忙活 !至于峰高问题可能是高效液相条件不对,柱子 流动性比例(甲醇少用点)。看你那图两分钟左右的是溶剂峰吧 可能你真没分离出东西来
6楼2013-07-13 22:20:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aliyue

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


karl2100: 金币+1, 谢谢! 2013-07-16 00:13:00
如果是C18的话,保留时间在3分钟,还是可以的,也不是说保留时间越长越好,主要是看你的组分能不能分得开。
实在要延长的话,就调节比例吧,把流动相的极性调节大一些。
另外,你可以换一你的流动相,改成甲醇(或者乙腈)-水做流动相,适当调节柱温,流速0.8-1,等度。如果分不开的话,添加0.3%的乙酸。
进样的话,应该不会有问题的,如果是自动进样。。。
希望采纳,不采纳,你可以试一下。。。愿顺利毕业
[Bruce Lee] [药物分析与工艺分析]
7楼2013-07-15 19:41:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aliyue

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

对了,另外有一点,你的基线有点问题
[Bruce Lee] [药物分析与工艺分析]
8楼2013-07-15 19:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

260919368

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还是应该考虑样品的急性,峰的吸收很弱,考虑是否样品没有被系脱下来,在冲洗柱子时观察是否有强吸收峰。
乙腈和水的梯度洗脱分离度一般来说会好些,淡然有些黄酮类物质还是甲醇比较好些。
其实应该先确定你样品的最大吸收波长,找到最强的吸收波长,总感觉你的吸收峰弱,当然也可能是样品浓度很低。
9楼2013-07-17 09:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乘风牧云

木虫 (职业作家)

--

你的目的是什么啊亲,你是什么化合物都要还是有目标峰,什么都要就增大进样量,把峰都接出来就好了,有目标峰的话要标定一下是哪个峰,直奔目标去就好了
乘长风以牧青云
10楼2013-07-23 11:37:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jinanxmz 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 材料与化工专硕调剂 +3 heming3743 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:05 by peike
[基金申请] 国自科面上基金字体 +5 iwuli 2026-03-12 6/300 2026-03-16 13:13 by Kamiu_MK
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 0805,333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123! 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
请填处理意见