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yangls103

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jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励应助! 2013-07-18 22:00:22
直接用你的免疫原就行了,不过包被浓度要高一点(10 μg/mL),以前我们全菌免疫的时候效价不会太高,也就4000-10000左右,所以你稀释梯度别太高,试试吧!其实挺简单的。五免也要赶紧了,不然后面效价下降就得不偿失了。希望对你有用。
Orbetterit,orenjoyit!
2楼2013-07-16 10:25:00
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
yangls103: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-07-17 09:44:26
gyesang: 金币+1, 鼓励应助! 2013-07-18 22:00:33
2楼正解,如果免疫次数过多,有可能效价就会下降,效价是个曲线增长的过程,不过包被抗原可以做个梯度也可以,包被浓度过大,增大非特异性吸附,也会影响效价的检测。可以从0.25μg/mL开始设置梯度
3楼2013-07-16 13:52:38
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yangls103

禁虫 (小有名气)

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4楼2013-07-17 09:43:22
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jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-18 22:00:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by ericyo918 at 2013-07-16 13:52:38
2楼正解,如果免疫次数过多,有可能效价就会下降,效价是个曲线增长的过程,不过包被抗原可以做个梯度也可以,包被浓度过大,增大非特异性吸附,也会影响效价的检测。可以从0.25μg/mL开始设置梯度

这个包被浓度的问题倒是不用怕太多,有对照在的话,没问题的,稀释梯度就是你侧效价的时候,将血清稀释成不同的浓度,可以是等比数列梯度,你可以看一下效价的定义。
Orbetterit,orenjoyit!
5楼2013-07-17 09:49:10
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yangls103

禁虫 (小有名气)

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6楼2013-07-17 09:50:26
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jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家


gyesang: 金币+1, 鼓励跟贴交流! 2013-07-18 22:01:17
引用回帖:
2楼: Originally posted by jfj_tj at 2013-07-16 10:25:00
直接用你的免疫原就行了,不过包被浓度要高一点(10 μg/mL),以前我们全菌免疫的时候效价不会太高,也就4000-10000左右,所以你稀释梯度别太高,试试吧!其实挺简单的。五免也要赶紧了,不然后面效价下降就得不偿 ...

测定个效价,还没有必要优化包被浓度的吧,大侠,用抗原去检测抗体,至于您说的非特异吸附,个人觉得有对照组,做出来可以扣去背景的吧,至于您说的从0.25μg/mL开始,我做的全菌免疫就是后面做过期盼滴定也没有这么低的,或许是我们的抗原不是很好吧!
Orbetterit,orenjoyit!
7楼2013-07-17 09:53:30
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jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

引用回帖:
3楼: Originally posted by ericyo918 at 2013-07-16 13:52:38
2楼正解,如果免疫次数过多,有可能效价就会下降,效价是个曲线增长的过程,不过包被抗原可以做个梯度也可以,包被浓度过大,增大非特异性吸附,也会影响效价的检测。可以从0.25μg/mL开始设置梯度

不小心点了回复到三楼去了,:这个包被浓度的问题倒是不用怕太多,有对照在的话,没问题的,稀释梯度就是你侧效价的时候,将血清稀释成不同的浓度,可以是等比数列梯度,你可以找点资料看一下效价的定义,那样你对稀释梯度就理解了,不难的。“
Orbetterit,orenjoyit!
8楼2013-07-17 09:58:35
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by jfj_tj at 2013-07-17 10:53:30
测定个效价,还没有必要优化包被浓度的吧,大侠,用抗原去检测抗体,至于您说的非特异吸附,个人觉得有对照组,做出来可以扣去背景的吧,至于您说的从0.25μg/mL开始,我做的全菌免疫就是后面做过期盼滴定也没有这 ...

0.25是从比较低的浓度开始,基本上那个浓度是做不出来的,优化抗原浓度如果你觉得没必要就没必要呗,关键是你自己定义的包被浓度是如何得到的呢?优化下还是比较严谨的吧
9楼2013-07-18 11:00:50
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