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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 前处理 » 做HPLC之前的SPE
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polymeryjh

金虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 0812502012 at 2013-07-10 17:25:07
微溶于水肯定淋洗的时候会随杂质留下来，回收率受到影响，过了柱子再进HPLC问题不是很大，我做实验的时候杂质峰变少而且小了，我们用的SPE柱是自己装的，比买装好的便宜一些，一样用...

自己怎么组装啊 需要买哪些材料啊 我们课题组没有人做过类似的 所以打算买呢
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机会为有准备的人准备
11楼2013-07-10 17:29:10
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wy1518

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
polymeryjh: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢 回答很详细 2013-07-10 19:38:45
还是买吧 自己装的可能会漏  装置以后用的多的话可以买一套 安捷伦的要大几千一套吧 你现在可以用铁架台夹住柱子然后活化 先甲醇3毫升后水3毫升 然后上样 你不知道自己的物质会不会保留 所以最好把滤液收集到 然后把柱子水洗5毫升 最后用5毫升甲醇洗脱 收集洗脱液氮吹干 用流动相定容到一毫升 过0.45微米滤膜进样
你的样品在柱子上面有保留的可能性比较大

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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12楼2013-07-10 18:10:22
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polymeryjh

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wy1518 at 2013-07-10 18:10:22
还是买吧 自己装的可能会漏  装置以后用的多的话可以买一套 安捷伦的要大几千一套吧 你现在可以用铁架台夹住柱子然后活化 先甲醇3毫升后水3毫升 然后上样 你不知道自己的物质会不会保留 所以最好把滤液收集到 然后把 ...

估计以后用得不多 老板也不会同意买一套 所以还是打算买小柱子用铁架台固定的办法  请问你知道哪家的比较好吗 方便给个你们以前用的商家的信息吗?
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机会为有准备的人准备
13楼2013-07-10 19:42:36
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183186292

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
polymeryjh: 金币+10, ★★★很有帮助, thks 2013-07-11 19:03:03
基本是这样的顺序
1，condition         一般是用methanol
2，equilibrate       用水
3，load           你所要被分离的sample
4，wash          可以洗脱杂质的溶液  在这一步应该是你想要除盐
5，elute         洗脱下来你想要保留的物质
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坚持就是胜利
14楼2013-07-11 08:48:22
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B
引用回帖:
7楼: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-10 15:20:18
我看其他书上说 先淋洗去杂质 再快速冲洗得到目标物
我想请问 后面的一步为什么要很快啊   假如和前一步一样 都只是靠重力留下来会有什么问题吗?...

快速淋洗，是为了降低待测物质在柱子上的死吸附
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我那么努力，就是为了在更高的层次遇见你！
15楼2013-07-11 08:48:34
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polymeryjh

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 183186292 at 2013-07-11 08:48:22
基本是这样的顺序
1，condition         一般是用methanol
2，equilibrate       用水
3，load           你所要被分离的sample
4，wash          可以洗脱杂质的溶液  在这一步应该是你想要除盐
5，elute     ...

请问你用过SPE C18的柱子吗 是什么牌子的啊 比较好用实惠啊
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机会为有准备的人准备
16楼2013-07-11 19:05:10
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polymeryjh

金虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2013-07-11 08:48:34
快速淋洗，是为了降低待测物质在柱子上的死吸附...

那个SPE的C18有封端和未封端的 在我的这个情况中 选二者有何差别啊
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机会为有准备的人准备
17楼2013-07-12 10:30:44
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B
引用回帖:
16楼: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-11 19:05:10
请问你用过SPE C18的柱子吗 是什么牌子的啊 比较好用实惠啊...

所有牌子都是这个操作顺序
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18楼2013-07-12 11:24:16
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B
引用回帖:
17楼: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-12 10:30:44
那个SPE的C18有封端和未封端的 在我的这个情况中 选二者有何差别啊...

这个差别，对你实验的影响不是本质的。不用纠结
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19楼2013-07-12 11:25:03
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183186292

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-11 19:05:10
请问你用过SPE C18的柱子吗 是什么牌子的啊 比较好用实惠啊...

我没用过这个C18的  所以不太了解  不好意思哈
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坚持就是胜利
20楼2013-07-13 10:33:21
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