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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助——质粒大提跑胶成这样
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zyllucky

金虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by Bella0224 at 2013-07-09 15:12:28
那如果按照试剂盒的要求，加入了相应的溶液2后，菌液木有变透明，是否可以再多加入一些，直到变透明呢？...

可以多加些溶液II，但要先相应地加入溶液I，之后加溶液III的时候也要做相应调整（溶液I，II，III的比例对提质粒很重要）。但如果发生溶液浑浊，做好是重新培养新菌体，提取时增加溶液I，II，III体积。
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糊涂仙儿
21楼2013-07-11 20:57:32
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛

【答案】应助回帖

琼脂胶加热沸腾，胶的浓度过高，0.8多家人蒸发可能到1%了，胶一定充分凝固再电泳
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但愿人长久
22楼2013-07-12 09:30:26
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liutong1026

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1，胶跑时间太长了
2，你的质粒都好像酶切的样了
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23楼2013-08-22 10:44:16
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跳舞的骆驼

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

maker上样量有点多，不过不是什么大问题。我也提过那么大的质粒，不过用的是天根普通的质粒小提试剂盒。结果还好，看你图的样子是蛋白污染，DNA根本没提出来。建议在去蛋白的步骤下功夫，还有你的质粒是低拷贝吗？如果是的话，要注意喽！
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24楼2013-08-22 12:52:02
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研究室新生

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 冰风颤木 at 2013-07-08 16:48:46
你的凝胶中EB含量加了吗

猜猜我是谁~~~
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人生是一棵不停生长的树。
25楼2014-01-09 17:00:10
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也遇到过这种情况，当时的解释是质粒提的不好，可能是降解掉了~~~你再抽提一次试试~~~
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人生是一棵不停生长的树。
26楼2014-01-09 17:01:32
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1009238055

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你质粒的点样孔里有残留，证明菌没有完全破碎啦，天根盒子里菌体重悬时加完P1你应该充分混匀的。你若提取的不是大肠杆菌质粒，应加适量溶菌酶。
     至于Marker，你要是想要条带漂亮点的图，就做浓度稍微高点的胶，溶解充分，凝固充分，marker条带会很漂亮的啦。
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27楼2015-01-04 21:15:21
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