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小核桃小

银虫 (初入文坛)

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8楼: Originally posted by darkarrow at 2013-07-09 03:20:15
图没问题，但是最好能够同时也用B作为抗体去拉A以确认结果。

是的，我只想先问一下，这样对不对？因为换B作抗体，道理也一样

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呆呆的呆呆

11楼2013-07-09 21:59:06

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开开心心520

木虫 (小有名气)

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10楼: Originally posted by 小核桃小 at 2013-07-09 21:58:25
看来你没懂这个CO-IP怎么做。先提总蛋白，分成三份，其中一份，是input. 一份用做CO-IP,一份用做Control.input我之所以要在后面做WB验证的时候，跑两个孔，是想证明，这个总蛋白里，既有我的A蛋白，也有我的B蛋白。 ...

按照楼主的做法，最后用B的抗体做WB，蛋白的分子量应该是B的分子量还是A+B的分子量呢？

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12楼2013-08-29 10:26:08

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一纸小蜜蜂

铜虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

是这样的理论上，不过你还得用B沉淀A，还有就是对照IgG做出来可能也会有结合的

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13楼2013-11-08 10:42:10

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Lris

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9楼: Originally posted by 遥控器68 at 2013-07-09 15:31:11
也许是我理解你的图不到位。想问一下：不知道用A做一抗，为何会AB都在一张膜上同时单独有抗到，如果是AB结合的情况倒是可能，且抗到的A-B会比单独的A or B分子量大些（说到底我是不明白你俩input是怎么回事）。
主 ...

为什么是两个input结果不一样，在同一张膜上，相同的蛋白样品跑出来的条带不应该是一模一样的吗，

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14楼2014-09-23 21:55:00

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