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小核桃小

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by darkarrow at 2013-07-09 03:20:15
图没问题,但是最好能够同时也用B作为抗体去拉A以确认结果。

是的,我只想先问一下,这样对不对?因为换B作抗体,道理也一样
呆呆的呆呆
11楼2013-07-09 21:59:06
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开开心心520

木虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 小核桃小 at 2013-07-09 21:58:25
看来你没懂这个CO-IP怎么做。先提总蛋白,分成三份,其中一份,是input. 一份用做CO-IP,一份用做Control.input我之所以要在后面做WB验证的时候,跑两个孔,是想证明,这个总蛋白里,既有我的A蛋白,也有我的B蛋白。 ...

按照楼主的做法,最后用B的抗体做WB,蛋白的分子量应该是B的分子量还是A+B的分子量呢?
12楼2013-08-29 10:26:08
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一纸小蜜蜂

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是这样的理论上,不过你还得用B沉淀A,还有就是对照IgG做出来可能也会有结合的
13楼2013-11-08 10:42:10
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Lris

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 遥控器68 at 2013-07-09 15:31:11
也许是我理解你的图不到位。想问一下:不知道用A做一抗,为何会AB都在一张膜上同时单独有抗到,如果是AB结合的情况倒是可能,且抗到的A-B会比单独的A or B分子量大些(说到底我是不明白你俩input是怎么回事)。
主 ...

为什么是两个input结果不一样,在同一张膜上,相同的蛋白样品跑出来的条带不应该是一模一样的吗,
14楼2014-09-23 21:55:00
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

你的Input应该是1个,因为IgG组和实验组都是用同一个裂解液样品做实验。
15楼2014-09-24 09:51:45
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Lris

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-09-24 09:51:45
你的Input应该是1个,因为IgG组和实验组都是用同一个裂解液样品做实验。

是不是分3组就可以了,裂解液样品input组,免疫沉淀ip组和control组哦?
16楼2014-09-26 21:24:39
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
16楼: Originally posted by Lris at 2014-09-26 21:24:39
是不是分3组就可以了,裂解液样品input组,免疫沉淀ip组和control组哦?...

17楼2014-09-27 09:18:50
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刘芳$

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by loudbing at 2013-07-08 10:55:04
可以加一个上清里的图

想咨询一下,加上清液的图是为了证明什么呢,在其他帖子也看见有人提到这点,谢谢
18楼2015-04-07 16:37:10
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