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电泳新手上路请求帮助><
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老师突然要我跑电泳，想借助电泳直观观察发酵过程中大豆蛋白的降解情况。算是一个辅助或者佐证，要求不是很高。 浓缩胶5%；分离胶12%；电压75V-100V，总时间大概100min 字有点多麻烦大家了 1.我现在还不太会分析电泳图，我这块胶是跑过头了吗？这样算是拖尾吗？我的蛋白浓度合适吗？是否需要提高浓度？ 2.除去marker外，从左数第一到第七是同个样品相同条件下随着发酵时间的延长蛋白的变化情况，第一到第四很清楚我能看出来，5、6、7同样的处理方法为什么和前四个条带不一样呢？ 3.很多人说加入上样缓冲液煮沸后要离心，然后用枪头打散再上样。我想问离心的作用是什么？上样之前还要打散那不是把杂质都搅上来了吗？我测这种属于食品类的东西，虽然是发酵食品的但是细胞碎片不会很多吧，也需要离心吗？ 4.加样的时候发现飘的有些厉害，我可以把2×上样缓冲液换成5×吗（样品液体积不变）？ 5.我把样品冻干之后加水溶解，离心取上清，然后直接加loading buffer煮沸上样，从图上看需要去除杂质吗？ 还有哪些问题请大神帮我指出来吧，跪谢了。。。。。。。。。。。。。  IMG_2852.JPG |
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