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jasmine419

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急:硝酸银染色的时候出现白色沉淀,为何!为何!

我正在做聚丙烯酰胺凝胶电泳,用的是伯乐的预制胶Mini-PROTEAN® TBE Precast Gel,跑胶缓冲液用的是1X TBE。奇怪的是,加入硝酸银染色,会慢慢析出白色沉淀,在胶的表面也会形成白色的膜,一抹就能掉的那种。

试了两次都是这样,怎么回事呢??
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by jasmine419 at 2013-07-05 16:27:44
敏感性高啊

银染针对的是蛋白质吧,你做RNA用银染做什么呢?
6楼2013-07-06 06:22:01
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changes

木虫 (正式写手)

不知你跑完电泳后水洗过没有?漂洗去除杂质。
另外,你硝酸银染色用的是哪种碱,碳酸氢钠还是氢氧化钠?
加甲醛了吗?
10楼2013-07-08 15:15:53
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普通回帖

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-05 14:50:00
从你的描述中,有点confused,你到底想做什么东西呢,蛋白还是DNA?Biorad的TBE预制一般用来核酸的。Boric acid和silver会产生白色的colloidal的
2楼2013-07-05 13:20:49
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jasmine419

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lwiaanngg at 2013-07-05 13:20:49
从你的描述中,有点confused,你到底想做什么东西呢,蛋白还是DNA?Biorad的TBE预制一般用来核酸的。Boric acid和silver会产生白色的colloidal的

我是用来做RNA电泳的。

这个可以怎么避免呢?通过漂洗,可以解决吗?
3楼2013-07-05 14:26:04
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by jasmine419 at 2013-07-05 14:26:04
我是用来做RNA电泳的。

这个可以怎么避免呢?通过漂洗,可以解决吗?...

为什么要用银染呢?
4楼2013-07-05 14:54:20
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jasmine419

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lwiaanngg at 2013-07-05 14:54:20
为什么要用银染呢?...

敏感性高啊
5楼2013-07-05 16:27:44
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-08 11:11:13
TBEbuffer直接加硝酸银看看什么现象,如果出现沉淀说明有氯离子,水不纯。
7楼2013-07-06 06:40:40
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jasmine419

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lwiaanngg at 2013-07-06 06:22:01
银染针对的是蛋白质吧,你做RNA用银染做什么呢?...

银染色也可以用于核酸的,你可以看看相关文献

另外,我的朋友是学化学的,他说硼酸和硝酸银是不反应的。这不是和你说的矛盾吗?
8楼2013-07-08 11:07:33
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jasmine419

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-07-06 06:40:40
TBEbuffer直接加硝酸银看看什么现象,如果出现沉淀说明有氯离子,水不纯。

谢谢,我正在尝试你的建议。
9楼2013-07-08 11:08:22
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