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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 回帖置顶 2013-06-29 13:30:54
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 斑斑辛苦了 2013-06-29 13:58:21
对于新手来说，特别是之前不是从事这方面的研究的，我结合自身的经历来说一下吧
找来相关研究内容的硕士学位论文或者博士学位论文，就当是读教材一样，先来科普让自己知道大概里面有那些常用的专业术语，那些实验技术手段，那些实验技术手段所使用的试剂和耗材等等，这样当你过一段时间后，就会有个印象，再看英文文献可能就会速度快很多，看起来也不是那么吃力。
看文献：先看你们课题组之前的发表的文章当然是和你以后研究方向相关的，如果有师兄师姐的话可以缠着他们，现在不是有句话很流行吗‘？别怕，有师兄在，师兄帮帮忙 跑题了
这样你就不用茫茫大海中找文章了
这个时候你也要自己看一些比较厉害的综述类文章，什么厉害呢？就是发表的期刊比较高，被引次数也高的这种文章，能让你清楚的知道什么热点，什么冷门
看文献怎么看论坛里面随处能找到相关的文献
此时也不要忘记看相关的教材和实验操作，楼主最好到图书馆借一些相关的实验教材
比较好的有
生物化学实验原理与技术 祈元明主编 化学工业出版社
生物化学与分子生物学实验教程 北京大学医学出版社的
里面的实验很详细还有很多注意事项比如什么有毒呀，应该采取哪些防护措施呀之类的
举个例子加入你要做WB，这里面就会告诉你有毒，做的时候该注意哪些、？当然任何一本书中都会提到相关的信息，这个完全看你个人喜好了
其实资源有很多，关键是看你怎么去索取，学生物有六个网站是需要关注 生物谷 丁香园 生物秀论坛 生物114 生物帮 再就是伟大的emuch牛人多多，高手如云
期待你的精彩吧
以下是一些网上容易找到的蛋白质相关实验技术
紫外吸收法测定蛋白质含量
蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等残基，它们的结构中具有共轭双键，对紫外光有吸收作用，其最大值在280nm波长处。在此波长附近，蛋白质溶液的光吸收值与其含量（范围是0.1~1.0mg/ml）成正比，因此，280nm的吸光度可用作蛋白质的定量测定。若将已知不同浓度的蛋白质标准溶液在280nm处测定，并作标准曲线，即可求得未知溶液的蛋白质浓度。此法测定迅速，用量较少，而且不消耗样品和试剂。但若样品中含有其他在280nm吸收的物质，如嘌呤嘧啶等化合物时，就有干扰作用。
关键词：紫外吸收法蛋白质酪氨酸色氨酸苯丙氨酸共轭双键
（一）原 理
蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等残基，它们的结构中具有共轭双键，对紫外光有吸收作用，其最大值在280nm波长处。在此波长附近，蛋白质溶液的光吸收值与其含量（范围是0.1~1.0mg/ml）成正比，因此，280nm的吸光度可用作蛋白质的定量测定。若将已知不同浓度的蛋白质标准溶液在280nm处测定，并作标准曲线，即可求得未知溶液的蛋白质浓度。此法测定迅速，用量较少，而且不消耗样品和试剂。但若样品中含有其他在280nm吸收的物质，如嘌呤嘧啶等化合物时，就有干扰作用。
（二）试剂及器材
（1）标准蛋白质溶液：准确称取经凯氏定氮法校正的结晶牛血清白蛋白，配制成浓度为1mg/ml的溶液。
（2）待测蛋白质溶液：浓度为1mg/ml左右的蛋白质溶液。
（三）操作
1. 280nm的光吸收法
（1）标准曲线的绘制：取8支试管，编号后按下表加入试剂。
混匀，选用光程为1cm的石英比色杯，在紫外分光光度计280nm波长处以0号管调“零”分别测定各管溶液的光密度（OD280）。以纵坐标为光密度值，横坐标为蛋白质浓度绘出标准曲线。
（2）样品测定：取待测蛋白质溶液1ml，加入蒸馏水3ml，混匀，按上述方法测定280nm波长处的光密度值，并从标准曲线上查出待测蛋白质的浓度。
2．280nm和260nm的吸收差法将待测的蛋白质溶液稀释到光密度在0.2~2.0之间，在波长280nm和260nm处以相应的溶液作空白对照，分别测得待测样品的光密度值（OD280和OD260）。应用280nm和260nm的吸收差法经验公式直接计算出蛋白质浓度。
公式： 蛋白质浓度（mg/ml）=1.45 OD280—0.74 OD260
[ Last edited by myprayer on 2013-6-29 at 13:35 ] |
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