应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 蓝藻DNA提取，液氮研磨
222/3返回列表上一页123下一页
查看: 2300  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

oranzxc

金虫 (初入文坛)
要一直持续补充液氮，你的潮湿了就是液氮没了冷的样品凝结的空气中的水造成的
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

凝霜枫叶
11楼2013-07-01 09:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凝霜枫叶

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by oranzxc at 2013-07-01 09:29:31
要一直持续补充液氮，你的潮湿了就是液氮没了冷的样品凝结的空气中的水造成的

哦，是这样呀，谢谢
回复此楼
12楼2013-07-01 14:08:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凝霜枫叶

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-29 08:26:54
丝状藻比单细胞藻更好破。蓝藻的细胞比较小，液氮研磨的效果不是很好。...

我来查查文献，试试，请问您有相关的参考文献吗？能不能发给我一份呢，谢啦
赞一下 回复此楼
13楼2013-07-01 14:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 凝霜枫叶 at 2013-07-01 14:14:10
我来查查文献，试试，请问您有相关的参考文献吗？能不能发给我一份呢，谢啦...

我用的方法没有文献，是实验室protocol。你如果要酶学方法里的老方法的话我可以发给你。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

凝霜枫叶
14楼2013-07-02 00:25:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凝霜枫叶

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-02 00:25:59
我用的方法没有文献，是实验室protocol。你如果要酶学方法里的老方法的话我可以发给你。...

那你实验室的protocol和酶学老方法都方便告诉我吗？真心感谢呀，，我的邮箱jiaoshujing1988@163.com，方便的话请发给我吧，
赞一下 回复此楼
15楼2013-07-02 08:51:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 凝霜枫叶 at 2013-07-02 08:51:33
那你实验室的protocol和酶学老方法都方便告诉我吗？真心感谢呀，，我的邮箱jiaoshujing1988@163.com，方便的话请发给我吧，...

我用的方法：
1. Scratch a loop of cells from a plate and resuspend cells into 0.5 ml of isolation buffer (50 mM Tris-HCl pH 8.5, 5 mM EDTA, 50 mM NaCl)
2. Add 10 μg DNase-free RNase
3. Add same volume of phenol, heat at 65°C for 5-10 min, mix 2-3 times in between
4. Extract 2 x with phenol:chloroform (1:1) and once with chloroform:amyalcohol (24:1), invert tubes gently by now and then for 5 min
5. Add 1 µg RNase, RT for 30 min
6. Add 1/10V 3M sodium acetate pH5.2, and 2V cold ethanol, store at -20 °C 2h or over night
7. Collect DNA at 14 000 g for 15 min, wash the pellet with 70 % ethanol.
8. Dissolve pellet into 100 µl of TE/water/ 5 mM Tris-HCl pH 8.
所得DNA的浓度大致为几百ng/μl，取0.5-1μl为模板做PCR即可。

酶学方法167卷的方法见附件：
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 82[78]DNAtransformation.pdf
    • 2013-07-02 10:01:58, 580.58 K

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

凝霜枫叶
16楼2013-07-02 10:02:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sh_9153

银虫 (小有名气)
倒的时候有可能会出来，研磨的时候不是很厉害，小心点就好
赞一下 回复此楼
17楼2013-07-02 10:13:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凝霜枫叶

银虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by sh_9153 at 2013-07-02 10:13:36
倒的时候有可能会出来，研磨的时候不是很厉害，小心点就好

请问研磨的时候需要很大力度吗？
赞一下 回复此楼
18楼2013-07-02 13:24:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凝霜枫叶

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
16楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-02 10:02:25
我用的方法：
1. Scratch a loop of cells from a plate and resuspend cells into 0.5 ml of isolation buffer (50 mM Tris-HCl pH 8.5, 5 mM EDTA, 50 mM NaCl)
2. Add 10 μg DNase-free RNase
3. Add same  ...

研究一下，谢谢啦
回复此楼
19楼2013-07-02 13:25:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凝霜枫叶

银虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-02 10:02:25
我用的方法：
1. Scratch a loop of cells from a plate and resuspend cells into 0.5 ml of isolation buffer (50 mM Tris-HCl pH 8.5, 5 mM EDTA, 50 mM NaCl)
2. Add 10 μg DNase-free RNase
3. Add same  ...

请问第五步和第八步是微克和微升吗？Add 1 µg RNase,100 µl
赞一下 回复此楼
20楼2013-07-02 16:20:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 凝霜枫叶 的主题更新
222/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭