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changyi_23金虫 (小有名气)
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[求助]
分泌蛋白
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| 我构建了一种融合蛋白 前面加了信号肽 但是就是分泌不出来 但是此信号肽与其他蛋白构建在一起 可以引导分泌 这是为什么呢 与什么的性质有关呢？？？ |
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lomis
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【答案】应助回帖
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1.每种蛋白最适合的信号肽是不同的，目前还未有一种信号肽是适合所有蛋白分泌表达的，你可以尝试一下其他信号肽。可参考：Optimization of Protease Secretion in Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis by Screening of Homologous and Heterologous Signal Peptides 2. 蛋白本身性质决定了其不可能分泌表达或者分泌表达量极少，这个一般多见于异源表达或者是膜蛋白和胞内蛋白的异源表达。 这种情况怎么办呢：1. 修改融合蛋白的可变融合序列，如A+B融合表达，保留关键A部分，更换可替代B部分，使得整体蛋白活性如之前融合序列；2.更改表达菌株，如芽孢杆菌分泌不出来的可换酵母试试。3. 放弃分泌表达，改用胞内表达策略。 |
2楼2013-06-26 16:27:12
changyi_23
金虫 (小有名气)
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3楼2013-06-27 08:27:16