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changyi_23

金虫 (小有名气)

[求助] 分泌蛋白

我构建了一种融合蛋白 前面加了信号肽 但是就是分泌不出来 但是此信号肽与其他蛋白构建在一起 可以引导分泌 这是为什么呢 与什么的性质有关呢???
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lomis

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.每种蛋白最适合的信号肽是不同的,目前还未有一种信号肽是适合所有蛋白分泌表达的,你可以尝试一下其他信号肽。可参考:Optimization of Protease Secretion in Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis by Screening of Homologous and Heterologous Signal Peptides
2. 蛋白本身性质决定了其不可能分泌表达或者分泌表达量极少,这个一般多见于异源表达或者是膜蛋白和胞内蛋白的异源表达。 这种情况怎么办呢:1. 修改融合蛋白的可变融合序列,如A+B融合表达,保留关键A部分,更换可替代B部分,使得整体蛋白活性如之前融合序列;2.更改表达菌株,如芽孢杆菌分泌不出来的可换酵母试试。3. 放弃分泌表达,改用胞内表达策略。
没有命运,只有选择!
2楼2013-06-26 16:27:12
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changyi_23

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lomis at 2013-06-26 16:27:12
1.每种蛋白最适合的信号肽是不同的,目前还未有一种信号肽是适合所有蛋白分泌表达的,你可以尝试一下其他信号肽。可参考:Optimization of Protease Secretion in Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis by ...

真心很感谢~
3楼2013-06-27 08:27:16
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