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[求助]
请问有人养过类似MCF7细胞团聚很厉害的细胞吗？
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本人养细胞新手，最近MCF7细胞总是长不快，与其在网上流传的疯长，放养的特性不符。用的是Hyclone的瓶装MEM培养基，+10%FBS,国产四季青。 刚复苏时长得还好，后来一天一次换液，结果细胞出现老化，长得不好。 听说换液次数太多我改成了两天一次换液，然而还有几个不确定。 由于团聚很厉害，往往MCF7细胞在消化两三天后就又形成团聚。 1.师兄说团聚长不快，因为中间的受到密度抑制没法长，只有周围的在长。 2.又打电话问了别的养细胞的老师，老师建议保持团聚，因为这是MCF7细胞的生长特性，应让其维持其自然生长特性，团聚了才长得快。 除了上述这个问题我不是很清楚之外， 还有一个问题就是每次换液的时候是否应该全部倒掉拿PBS洗两遍再换，还是使用半换液的手法？ 1.有老师介绍说细胞会分泌生长因子所以不应过两天就全换，应该坚持半换。 2.我们实验室大部分的师兄师姐都是全换的。为了去除细胞排泄废物对其影响。而且半换液大部分是对于神经细胞这样比较脆弱的细胞而言的。 恳请大神给我支招，如果方便的话原理也告诉我，感激不尽！金币好说！ |
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