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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

[资源] 【专业学科】31道生物化学与分子生物学、细胞生物学和微生物学考研考博试题解答(原创)

本帖全部解答都是凌波丽做出（特别注明解答出处的少量题目除外），错误也全部由凌波丽负责！我从过去回答的网友提问的问题中选出很小部分整理出来，放在一起。不选入与实验细节相关的任何不可能出现在考研考博试题中的问题。转载请说明出处，谢谢！在"31道生物化学与分子生物学、细胞生物学和微生物学考研考博试题解答"中的两道未解答的题目的答案如下（我刚刚写好的，其他题目的答案都有）：

7.什么是GPI膜锚蛋白质，如何用SDS－PAGE检测质膜种是否有？
GPI－anchored protein，GPI（glycosylphosphatidylinsitol）指糖基磷脂酰肌醇，GPI是质膜的组成成分，GPI骨架上的乙醇胺通过酰胺键固定于蛋白质的羧基端，成为蛋白质定位于细胞膜上的锚，这种结合到GPI的蛋白质即称为GPI锚蛋白。因为磷脂酶C(PLC)可从细胞表面将糖-肌醇磷脂锚连的蛋白质释放出来，所以我觉得在用PLC处理前后SDS－PAGE的迁移率应该不同吧，这样是不是可以检测有没有这种蛋白？
答：GPI－anchored protein，GPI（glycosylphosphatidylinsitol）指糖基磷脂酰肌醇，GPI是质膜的组成成分，GPI骨架上的乙醇胺通过酰胺键固定于蛋白质的羧基端，成为蛋白质定位于细胞膜上的锚，这种结合到GPI的蛋白质即称为GPI锚蛋白。“什么是GPI膜锚蛋白质”，提问者自己已经回答了。
如何检测出膜上是否有GPI－anchored protein，先要获得可能含有GPI－anchored protein的生物膜，也就是先获取特定细胞后，粉碎细胞（超声，研磨，机械剪切等），然后分级离心，分离出生物膜或者细胞器，而后粉碎细胞器再差速离心获得有关生物膜。用磷脂酶C(PLC)处理有关生物膜，溶解掉脂质，层析获得蛋白质，根据GPI－anchored protein的分子量收集色谱分离的峰尖分离物。然后先用胰蛋白酶有限水解色谱分离物，再用质谱鉴定色谱分离的得到的峰尖分离物的的各水解片段的精确分子量，与数据库中的相应的GPI－anchored protein的数据对比即知道两者是否相同；可以同时用不同的蛋白酶水解色谱分离的得到的峰尖分离物，再用质谱鉴定各个水解肽段的相对分子量，并与数据库中的对应数据比对。

16.举例说明核酸结构及构象多态性的生物学意义？
答：核酸结构及构象多态性表现在：
组成核酸的链的数目有多寡之分，DNA有单链，双联，三链，四链之分。三链DNA又有多种，DNA-RNA杂合链也有双链和三链。
有相同数目的链组成的核酸分子，会受到固有序列和环境条件的影响而采取迥然不同的构象,双链DNA在湿度不同和离子强度不同时可形成A型和B型。
RNA 的结构较之DNA的结构更复杂，更具多态性。DNA通常是在双螺旋结构基础上形成超螺旋。然而，单链RNA可以通过自身的回折形成多种多样的二级结构和高级结构，比如tRNA通过茎环结构形成三叶草型二级结构，在二级结构基础上又形成L型的三级结构。
　　　核酸结构的多态性必然导致核酸功能的多样性，但是这并非存在一一对应的关系。即并非每一种构象在系统中都有特定的功能。决定和影响核酸功能的因素很多，除了自身的结构外，协同、调节和控制起着重要的作用。
　　　---------刘次全等，核酸结构多态性，高等教育出版社，2000，P2-P3。
　　　核酸的功能多样性：
1.DNA是主要的遗传物质，某些病毒的基因组是RNA；
2.RNA能够作为遗传信息的搬运者；
3.RNA是单链，所以RNA能够利用其碱基序列在细胞中发现与其碱基序列互补的核酸分子（DNA或者RNA）。如此，特异性RNA能够指导其携带这些特异性RNA的蛋白质到达特定核酸部位加以修饰；
4.RNA能够作为RNA-Protein大分子复合体组装的支架；
5.RNA能够作为测量生理参数的传感器--------比如温度，离子或者代谢物浓度。
--------Gunter Meister,RNA Biology:An Introduction, Wily-VCH Verlag GmbH &Co.KGaA,2011,P11.

[ Last edited by zhweijun88 on 2013-6-27 at 16:53 ]

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