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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 降解菌筛选
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愤怒的咖啡兔

铜虫 (初入文坛)

[交流] 降解菌筛选

我要筛选多株PAM（污泥中一种有机物）降解菌，想和大家探讨或请教几个问题,1，富集是我是用2g鲜泥样直接加入富集液中呢还是取泥的上清液呢；2，富集周期多长？我之前做的是一周一次共4次不知道是不是短了些；3，梯度富集是不是有必要呢，我之前4次每次PAM的浓度都是1g/L；4，富集结束后涂板该怎么涂板呢（预实验（pH=7）筛选出大概有4-5株菌的样子，我是接种环划线涂板的，不知道科学不科学）。谢谢各位朋友了，期待你们的回复！！！！
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1楼 2013-06-18 10:44:14
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zhupeilei

木虫 (小有名气)
★
愤怒的咖啡兔(金币+1): 谢谢参与
我也回复一下吧。筛选菌落当然最好是取污泥啊，你的富集培养，目的在于筛菌，所以污泥处理不处理我觉得无所谓。至于驯化，一般两个月左右就可以了，浓度维持到一定程度，就不要加了，否则会有毒性。如果不想驯化，只想快速富集，那就没必要梯度富集，你可以在筛菌的时候，在选择培养基上多做几个浓度梯度，同样可以找到好的耐受菌株。划线分离菌株是正确的。
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3楼2013-06-18 21:01:32
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小小武

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
愤怒的咖啡兔(金币+1): 谢谢参与
laozuzunzhe: 金币+4, good！ 2013-06-18 18:59:04
PAM是污水处理厂进行污泥脱水压泥所加的试剂，属高分子聚合物。
1、对于是加污泥还是加上清液应该要看你实验课题的目的，如果是为了处理污泥，当然是加污泥好了。还要需要注意的是污泥中也是含有大量微生物的，所以加之前最好是处理一下；
2、对于培养的周期就要结合你所用菌种的生长周期了，应该是要多做几个周期进行对比的；
3、对于浓度梯度，我认为是很有必要的，你要确定一下最高耐受浓度的，而且最终也要确定一个最佳富集浓度啊；
4、划线法应该是没有什么问题的，你用的是单一菌种啊。
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2楼2013-06-18 17:43:55
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1921952610

铁虫 (正式写手)
★
愤怒的咖啡兔(金币+1): 谢谢参与
我觉得取上清吧。我也是猜测。这个可以通过实验分析的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-06-18 23:23:11
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