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amypengying

金虫 (小有名气)

[交流] 层析硅胶的选择及用量问题

请问用柱层析做中药材成分分离时,硅胶类型是如何选择的?还有,硅胶用量是由样品量还是柱子尺寸来定?初次做分离,很迷茫,诸位多帮忙
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1楼 2007-10-17 21:51:49
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hacker668

银虫 (小有名气)
★
楼兰少女(金币+1,VIP+0):感谢您热心参与应助
用标准的柱层析硅胶，用前现用95%乙醇泡过，后水洗至无醇。或者干法的话，需要110度烘4-6个钟头，样品溶解后用硅胶搅拌干燥再加于柱顶。现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。
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3楼2007-10-18 11:55:19
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kaikaifeng

荣誉版主 (文坛精英)

学术纯属狗屁~
★
amypengying(金币+1,VIP+0):谢谢
1.用标准的柱层析硅胶,建议你上硅胶前用石油醚:丙酮(8:1),或者纯氯仿冲一下柱子,现在硅胶里常有增塑剂(可看到黄色带,此为增塑剂,等其流出后,再用流动相)
2.样品量决定硅胶用量,硅胶用量决定柱子尺寸,一般样品:硅胶(1:15)比较好,据说日本那边都是用1:5,效果不错(我老板助手刚从日本回来,她说的)
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不扯淡，不忽悠，不懂不要装懂；不折腾，不闹腾，睁眼不说瞎话；凭良心做人，以品德服人。
2楼2007-10-17 23:37:27
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nishui

捐助贵宾 (著名写手)
★
楼兰少女(金币+1,VIP+0):感谢您热心参与应助
一般是将它们用溶液浸泡,首先脱脂,再可以依次用水或甲醇;丙酮或乙酸乙酯;石油醚等.这样药材里的东西就会根据极性大小而分别溶解在这些溶剂里面,然后活性测试,看你需要哪一部分.如果是甲醇部分,那么就将其旋干,然后过大柱,几米高的.时间一般一个星期要的.,大概用可以分出极性大小不同的化合物,然后再根据需要用稍小的柱子过.最后几十公斤的东西可能只能拿到几十毫克你要的,所以过柱过程中绝对不能浪费.
至于具体细节例如到底选多大柱子等,我觉得应该请教你的师兄师姐,他们的经验可以节省你很多时间,祝顺利!
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4楼2007-10-21 23:36:57
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