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hikers86

木虫 (正式写手)

[求助] 链霉菌孢子扫描电镜观察

本人菜鸟一枚,现在需要做一个链霉菌孢子的扫描电镜图,我在小木虫上看了一个步骤(http://muchong.com/html/201209/4909016.html): 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水(分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次,100%乙醇 2 次,15 min/次)→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次(20 min/次),每一步完成后经 8000 r/min 离心 5 min。将样品分别在 20℃、40℃和80℃冷冻 12 h,于冷冻干燥仪中干燥 12 h,备用。
他这个讲的是液体培养的细胞,我要看的是固体培养基上孢子形态,我应该怎么培养啊,插片?还是直接从培养基上挖一块?
另外乙醇脱水后是直接放冰箱干燥吗?可不可以用真空冷冻干燥仪干燥?
那位大侠帮帮小弟!
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fanfeng9999

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励新虫应助! 2013-06-18 18:52:06
hikers86: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-06-20 17:24:35
干燥是要用真空冷冻干燥的。要看固体培养基的孢子形态,是从培养基上打孔打下来一块,然后固定脱水,最后在真空冷冻干燥。
2楼2013-06-18 12:59:40
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hikers86

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fanfeng9999 at 2013-06-18 12:59:40
干燥是要用真空冷冻干燥的。要看固体培养基的孢子形态,是从培养基上打孔打下来一块,然后固定脱水,最后在真空冷冻干燥。

真空干燥之后拿出来会不会再吸水啊,电镜要排队,干燥完还要再放一段时间
3楼2013-06-19 10:49:42
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