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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

[求助] 微球包埋小分子多肽怎么测包埋率

我的多肽分子量在3.7KDa,是个碱性小分子多肽,用什么方法定量?我现在用Bradford法,测得595nm处的吸光度值,但是测出来的包埋率是0,而释放液中能测出多肽。是怎么回事呢?卖试剂盒的售后说小分子碱性多肽用Bradford法不好,我现在快研3了,着急得很啊,请大家帮帮我吧。

[ 来自小组 生物医药家族 ]
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-06-13 16:42:59
不知道能否有所帮助:丝素载药微球的制备及其性能研究 。
http://www.docin.com/p-170442780.html
2楼2013-06-13 14:35:15
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belladonae

金虫 (著名写手)

少将

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-06-13 16:43:04
你先说下你的包封率测定方法,不一定全是检测方法的问题。
3楼2013-06-13 15:53:24
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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by belladonae at 2013-06-13 15:53:24
你先说下你的包封率测定方法,不一定全是检测方法的问题。

谢谢你的回复,我是取冻干后的粉末10mg(精确称量),加2ml二氯甲烷溶解,加1.5ml水,振荡,1.5h后再将水层取出,再加1.5ml水进行第二次萃取,再振荡2h后取出水层,合并水层,取5ul加250ul试剂盒染色剂,摇床上1min,使其混匀,再在酶标仪上于595nm处测得吸光度值。标准曲线是将2.4mg/ml的多肽溶液逐级稀释进行测定,相关系数0.998。由5ul对应的含量换算,得到3ml萃取液的含量,从而换算出所有冻干粉中的含量,这种方法忽略了药物在微球中的不均匀分布。这是我测定的方法。
热情地工作,快乐地生活
4楼2013-06-13 16:48:59
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belladonae

金虫 (著名写手)

少将

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 自由的柚柚 at 2013-06-13 09:48:59
谢谢你的回复,我是取冻干后的粉末10mg(精确称量),加2ml二氯甲烷溶解,加1.5ml水,振荡,1.5h后再将水层取出,再加1.5ml水进行第二次萃取,再振荡2h后取出水层,合并水层,取5ul加250ul试剂盒染色剂,摇床上1mi ...

是否二氯甲烷将药物沉淀,无法萃取?
5楼2013-06-14 08:27:11
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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by belladonae at 2013-06-14 08:27:11
是否二氯甲烷将药物沉淀,无法萃取?...

你好,我的药物是溶于水不溶于二氯甲烷的。我现在就是怀疑小分子碱性多肽用Bradford法太不准确?
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6楼2013-06-15 14:19:15
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