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[求助]
NUNC maxisorp 96孔板技术求助
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各位大侠： 小弟最近在做ELISA，想把一种糖包被在96孔板上，然后加一抗和酶标二抗显色。现在发现我用BSA（全组分）对板进行封闭，不加一抗，只加酶标二抗（是抗His的HRP标记的抗体），显色以后OD值竟然超过了检测上限。我增加BSA封闭液的浓度从0.5%依次递增到20%。显色基本上是一样的。这说明我的酶标二抗发生了很强的非特异性吸附，或者说BSA没有把板子封闭上。我用的是NUNC的Maxisorp表面的高吸附板。是原文的作者推荐的 ，他说他也是用的这种。我不知道究竟是什么问题？ 理论上说酶标二抗在封闭做的很完全的情况下是不应该有这么高的背景的。但是我又不知道我的BSA都增加到20%了为什么还封不上？难道是BSA应该用V组分而不是全组分？ 请高手不吝赐教。 |
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