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zhangdapeng

木虫 (著名写手)

[求助] 细胞污染

大家好!由于实验条件有限,只能在一般的实验室中培养细胞,并且自己以前是学化学的对细胞培养这块不了解,前几天养了昆虫细胞Sf9,结果被污染了,也不知道是什么原因,看了网站上一些贴子,因此想问大家怎么去检测或采用什么方法来判断细胞是细菌污染、支原体污染、病毒污染?
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yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-06-07 08:43:50
细菌污染:肉眼可见的培养基变浑浊,显微镜下可以看到小的颗粒在游动。
真菌污染:肉眼可以见到霉斑,显微镜下能看到菌丝,一般肉眼看见了就不要打开显微镜看了,不然孢子飘啊飘的,以后实验更麻烦。
支原体污染:肉眼不可见,在确定培养基没有问题的情况下细胞生长比较缓慢,传代时间变长,慢慢死亡。
病毒污染:和支原体污染的表现出来的情况差不多,只是细胞会变大,而且死的会比支原体污染稍微快点。
你现在只是在普通实验室培养的话,对操作要求比较高,不然很容易污染,拿东西到超净台里面时都要喷点75%酒精消毒,超级台的玻璃挡板不要开的超过20cm,超净台用前紫外照个30min,里面常用的东西不要拿出来使用了,等等。。。。很多要注意的。。。。总之想在这种环境下保持不污染还是挺难的
一步一步!
5楼2013-06-06 16:26:08
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448935271

银虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与,不过回帖更倾向于交流,而不是应助 2013-06-07 08:42:33
你现在确定细胞被污染了的现象是什么呢?
万物皆有毒,只要剂量足
2楼2013-06-06 14:37:57
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-06-07 08:42:53
细菌污染:短时间内培养基变黄,浑浊,显微镜观察有细小颗粒做布朗运动。
支原体污染:肉眼无法观察,一般无明显变化,需做PCR或其它实验检测。
3楼2013-06-06 15:03:40
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sdgxlijin

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 应助指数-1, 答非所问 2013-06-07 08:43:22
本帖内容被屏蔽

4楼2013-06-06 15:34:17
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