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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

染料 电泳缓冲液的问题应该不大 不然marker 应该也会出现弥散。
问下 楼主的 模板是什么  ? 土壤DNA 样品还是  反转录以后的 cDNA 还是巢式PCR 的第一轮产物?

如果是 土壤DNA , 那么恭喜你 这玩意不好去 ,就将就做吧 ,要么重换试剂盒提DNA 要么就割胶纯化条带继续;
如果是反转录、第一轮PCR 产物, 那一般是因为模板过量或者上一轮反应中的酶啊什么的 没有去处吧。 要不你做个pcr产物纯化之后,之后再用作模板扩增试试看。
希望你试 之后  上来说说说你的结果。
11楼2013-06-05 13:54:55
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灵动的心

银虫 (小有名气)

是否加样过多呢(根据全式金公司的说法,加样过多也会出现这种情况)!
12楼2013-06-05 19:56:49
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youyouyi2008

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by wangzongda at 2013-06-04 22:12:20
加入一定量DMSO试试

你好 请问DMSO一般怎么加入?是溶解成溶液然后直接加入到PCR体系里吗?
13楼2013-06-05 21:24:42
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皇猪

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 老夏853 at 2013-06-05 13:54:55
染料 电泳缓冲液的问题应该不大 不然marker 应该也会出现弥散。
问下 楼主的 模板是什么  ? 土壤DNA 样品还是  反转录以后的 cDNA 还是巢式PCR 的第一轮产物?

如果是 土壤DNA , 那么恭喜你 这玩意不好去 ,就 ...

我DNA模板时植物基因组DNA。不过最近打算做个纯化,然后再pcr试试,估计要一段时间(以前没做过,纯化试剂盒还没来)结果出来后告诉你
没有梦想,那跟咸鱼有什么分别
14楼2013-06-05 22:42:22
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皇猪

木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by wangzongda at 2013-06-04 22:12:20
加入一定量DMSO试试

DMSO这怎么用????求解释
没有梦想,那跟咸鱼有什么分别
15楼2013-06-05 22:43:45
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火拼一把

银虫 (小有名气)

会不会是退化温度的原因,降低一点退火温度
莫管江湖多变幻,一心只把论文灌。
16楼2014-06-11 21:50:15
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火拼一把

银虫 (小有名气)

与退火温度有关吗?
莫管江湖多变幻,一心只把论文灌。
17楼2014-06-11 22:40:51
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笑西少

银虫 (小有名气)

内容已删除
天然产物化学
18楼2014-06-11 23:11:26
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皇猪

木虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 火拼一把 at 2014-06-11 22:40:51
与退火温度有关吗?

没多大关联,PCR反应体系有点小问题
没有梦想,那跟咸鱼有什么分别
19楼2014-06-16 19:17:19
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火拼一把

银虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 皇猪 at 2014-06-16 19:17:19
没多大关联,PCR反应体系有点小问题...

PCR反应体的具体问题是什么呢
莫管江湖多变幻,一心只把论文灌。
20楼2014-06-17 12:39:02
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