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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR结果出现弥散现象
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
染料 电泳缓冲液的问题应该不大 不然marker 应该也会出现弥散。
问下 楼主的 模板是什么  ？ 土壤DNA 样品还是  反转录以后的 cDNA 还是巢式PCR 的第一轮产物？

如果是 土壤DNA ， 那么恭喜你 这玩意不好去 ，就将就做吧 ，要么重换试剂盒提DNA 要么就割胶纯化条带继续；
如果是反转录、第一轮PCR 产物， 那一般是因为模板过量或者上一轮反应中的酶啊什么的 没有去处吧。 要不你做个pcr产物纯化之后，之后再用作模板扩增试试看。
希望你试 之后  上来说说说你的结果。
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11楼2013-06-05 13:54:55
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灵动的心

银虫 (小有名气)
是否加样过多呢（根据全式金公司的说法，加样过多也会出现这种情况）！
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12楼2013-06-05 19:56:49
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youyouyi2008

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wangzongda at 2013-06-04 22:12:20
加入一定量DMSO试试

你好 请问DMSO一般怎么加入？是溶解成溶液然后直接加入到PCR体系里吗？
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13楼2013-06-05 21:24:42
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皇猪

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 老夏853 at 2013-06-05 13:54:55
染料 电泳缓冲液的问题应该不大 不然marker 应该也会出现弥散。
问下 楼主的 模板是什么  ？ 土壤DNA 样品还是  反转录以后的 cDNA 还是巢式PCR 的第一轮产物？

如果是 土壤DNA ， 那么恭喜你 这玩意不好去 ，就 ...

我DNA模板时植物基因组DNA。不过最近打算做个纯化，然后再pcr试试，估计要一段时间（以前没做过，纯化试剂盒还没来）结果出来后告诉你
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没有梦想，那跟咸鱼有什么分别
14楼2013-06-05 22:42:22
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皇猪

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wangzongda at 2013-06-04 22:12:20
加入一定量DMSO试试

DMSO这怎么用？？？？求解释
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没有梦想，那跟咸鱼有什么分别
15楼2013-06-05 22:43:45
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火拼一把

银虫 (小有名气)
会不会是退化温度的原因，降低一点退火温度
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莫管江湖多变幻，一心只把论文灌。
16楼2014-06-11 21:50:15
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火拼一把

银虫 (小有名气)
与退火温度有关吗？
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莫管江湖多变幻，一心只把论文灌。
17楼2014-06-11 22:40:51
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笑西少

银虫 (小有名气)
内容已删除
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天然产物化学
18楼2014-06-11 23:11:26
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皇猪

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 火拼一把 at 2014-06-11 22:40:51
与退火温度有关吗？

没多大关联，PCR反应体系有点小问题
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没有梦想，那跟咸鱼有什么分别
19楼2014-06-16 19:17:19
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火拼一把

银虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 皇猪 at 2014-06-16 19:17:19
没多大关联，PCR反应体系有点小问题...

PCR反应体的具体问题是什么呢
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莫管江湖多变幻，一心只把论文灌。
20楼2014-06-17 12:39:02
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