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木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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10楼: Originally posted by sunny00博博 at 2014-07-20 15:44:37
质粒也可以用PCR回收试剂盒回收吗?你是用什么方法回收的呢?最后使用水溶的吗？我接下来要做转化需要5-10ug的质粒,是不是得回收好多管啊？...

可以用pcr试剂盒回收的，按照说明书作就可以了。你怎么转化那么多质粒？我们都转化几十纳克就长好多。

11楼2014-07-20 17:42:08

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新虫 (初入文坛)

引用回帖:

11楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-07-20 17:42:08
可以用pcr试剂盒回收的，按照说明书作就可以了。你怎么转化那么多质粒？我们都转化几十纳克就长好多。...

谢谢！我做的毕赤酵母的转化，是同通过同源重组整合到基因组的，载体说明书上要求转化那么多。

12楼2014-07-20 21:38:31

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铁虫 (初入文坛)

引用回帖:

5楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2013-09-18 08:36:40
楼主，你的问题解决了吗，我胶回收浓度只有十几纳克每微升，太低了，我切了200ul的体系才回收这么点

我回收的量差不多也是这么多，好像不影响实验，我都是继续做下面的实验了

13楼2014-07-22 17:06:31

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金虫 (小有名气)

建议酶切体系加大，回收时重复挂柱，洗脱液加热50度左右。

14楼2014-07-23 16:09:46

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