应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » AFLP试剂盒
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 1032  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lingling1988

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] AFLP试剂盒

AFLP试剂盒买了半年多了，由于实验进程除了买的最初用过两次外，中间的半年多一直保存于-40度，请问这样试剂盒中的试剂还能正常使用吗？试剂盒很贵，如果试剂出现问题要怎么补救呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2013-05-31 10:07:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lingling1988

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
6楼: Originally posted by shucanwei at 2013-06-06 00:36:43
感觉模板的量多了。
你可以用模板1（模板2都降解了，重新提取吧），再做一次酶切，体系如你的，用1ug的量就行，没切后的产物全部上样电泳，以同样模板量的不酶切的模板做为对照，一起电泳（即1ug的DNA稀释到25ul的 ...

好的，谢谢，接下来做双酶切我一定会注意的！那我先用模板1的酶切产物做接下来的连接、预扩和选扩，看看结果怎么样。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2013-06-06 08:51:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

shucanwei

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以的，放心用吧，没问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
唯以一人治天下，不以天下奉一人。
2楼2013-06-03 06:58:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingling1988

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by shucanwei at 2013-06-03 06:58:00
可以的，放心用吧，没问题

哦。我现在在做双酶切，但是酶切产物跑电泳什么都没出来，接着做连接、预扩增和选扩增后能跑出引物二聚体，请问这是不是说明在双酶切这部酶出了问题而后边的引物并没有问题呢？我是不是只要重新买双酶切的试剂就可以？
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-03 10:39:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

不一定是酶的问题，没有那么容易坏的，把酶切体系发来看看。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
唯以一人治天下，不以天下奉一人。
4楼2013-06-04 01:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingling1988

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
4楼: Originally posted by shucanwei at 2013-06-04 01:21:55
不一定是酶的问题，没有那么容易坏的，把酶切体系发来看看。

我后来又做了一次，增加了模板的量，酶切的体系是5×reaction buffer  5μl，template DNA 18μl（浓度大约是100ng/μl），EcorI/MseI enzyme mix 2.0μl ，25μl。跑出来的结果如图，顺序一次是10000的marker，模板1，模板2，模板1双酶切产物，模板2双酶切产物。
AFLP试剂盒
20130605172800.jpg
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-05 17:28:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lingling1988: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-06 08:49:24
感觉模板的量多了。
你可以用模板1（模板2都降解了，重新提取吧），再做一次酶切，体系如你的，用1ug的量就行，没切后的产物全部上样电泳，以同样模板量的不酶切的模板做为对照，一起电泳（即1ug的DNA稀释到25ul的体系），把电泳图再放上来看一下。
模板2不能用了。
其实你图中模板1的酶切结果是ok的。
赞一下 回复此楼
唯以一人治天下，不以天下奉一人。
6楼2013-06-06 00:36:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
7楼: Originally posted by lingling1988 at 2013-06-06 08:51:45
好的，谢谢，接下来做双酶切我一定会注意的！那我先用模板1的酶切产物做接下来的连接、预扩和选扩，看看结果怎么样。...

好的，祝顺利！
电泳结果用2%的胶跑吧。
赞一下 回复此楼
唯以一人治天下，不以天下奉一人。
8楼2013-06-07 00:46:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingling1988

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
8楼: Originally posted by shucanwei at 2013-06-07 00:46:19
好的，祝顺利！
电泳结果用2%的胶跑吧。...

嗯，好的~
回复此楼
9楼2013-06-07 09:50:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingling1988

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
8楼: Originally posted by shucanwei at 2013-06-07 00:46:19
好的，祝顺利！
电泳结果用2%的胶跑吧。...

最近我用得到的双酶切产物做了连接、预扩和选扩，然后跑了一下变性胶，模板是相同的，第一个和最后一个都是MARKER（图中看到的两条带是50bp和100bp），中间是24对不同的引物组合跑出的条带。得到的结果如下图，麻烦帮忙指教一下这次AFLP存在什么问题，应该注意哪些问题。谢谢~
AFLP试剂盒-1
变性胶.jpg
赞一下 回复此楼
10楼2013-06-11 21:14:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lingling1988 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +9 一样YWY 2026-03-31 9/450 2026-04-01 21:07 by 赖春艳
[考研] 342求调剂 +12 Mary Keen 2026-03-28 13/650 2026-04-01 21:02 by 流情牧豪
[考研] 085600，材料与化工321分，求调剂 +11 大馋小子 2026-03-27 11/550 2026-04-01 16:10 by cymywx
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +3 redcom 2026-04-01 3/150 2026-04-01 15:44 by 443933501
[考研] 321求调剂 +8 y-yh 2026-04-01 8/400 2026-04-01 14:44 by 星空星月
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +8 恬淡ye 2026-03-31 9/450 2026-04-01 14:34 by 逆水乘风
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 3/150 2026-03-31 20:27 by 求调剂zz
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +4 1段时间 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:56 by wxiongid
[考研] 085602 307分 求调剂 +10 不知道叫什么！ 2026-03-26 10/500 2026-03-31 19:53 by Dyhoer
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
[考博] 材料专业申博 +5 杜雨婷dyt 2026-03-29 5/250 2026-03-31 11:19 by oooqiao
[考研] 085601一志愿西北工业大学初试346 +4 085601初试346 2026-03-30 4/200 2026-03-31 07:47 by jp9609
[考研] 085701环境工程求调剂 +11 多久上课 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:21 by 研究僧导导
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +25 稻妻小编 2026-03-26 25/1250 2026-03-30 20:11 by 滴滴上岸呀
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +16 李李不服输 2026-03-26 16/800 2026-03-30 17:47 by wangjy2002
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-26 7/350 2026-03-30 08:39 by 探123
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 复试调剂，一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭