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静静秋

木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 露的想念 at 2014-10-09 14:43:54
你好!请问你的样品是怎么处理,我看nature上37度15min,还有样品的buffer是加的考马斯亮蓝而不是溴酚蓝吗?...

小分子样品buffer我用的是考马斯亮蓝,其实buffer用溴酚蓝也没有问题,只是小分子电泳用考马斯亮蓝更好上样,只是一个指示剂,没有多大影响。跑的都是非变性下的电泳,所以样品处理还是是煮沸15min,和SDS-PAGE没有区别
但愿,我的天空一直蔚蓝
11楼2014-10-10 09:50:40
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zhuimengjy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 李畅0527 at 2014-06-02 15:08:32
我最近也在做小分子量多肽的电泳,我的目标是3k的,看了些文献,感觉是3层胶效果会好一些。而且加尿素或者是甘油更适合小分子的电泳,条带会更清晰一些。

你好,我做的是3.8KD的,看一个marker 说明书只是制备了两层胶,能否给一下你的胶的配方,你做western 的一些转膜条件,非常感谢
12楼2014-10-15 15:15:30
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mine2mine

金虫 (小有名气)

楼主的问题解决了没有?最近我也在做tricine胶,三层的,我的marker一共8个条带,最小的三个总是不好,能跑开,但是脱色后颜色很淡。我想要10k以下的蛋白条带,但是跑完发现根本没多少。我想知道是什么原因会让我的marker(最后三个条带)显示不出来?我的样品是海洋来源的,会不会里面含有盐导致<10k的条带没跑出来?(1,8是marker,3,7是脱盐后的,其余是直接提取的)
Tricine胶应该怎么跑?
IMG_20150604_163041.jpg

Defeatshouldmotivateyou!
13楼2015-06-05 12:48:35
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浮生若茶520

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

能分享一下胶的配方吗
14楼2017-02-28 14:01:03
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