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淼淼好孩子

新虫 (初入文坛)

[求助] lps刺激raw264.7细胞 已有7人参与

我用lps刺激raw264.7细胞一直刺激不出来是为什么?我做了浓度梯度~细胞饥饿处理~都不行~我是干预24小时测的NO的浓度~是干预时间太久了么?实验组跟空白组毫无差异呀~
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阎魔瞳

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好,我也是用LPS刺激raw264.7,上学期做了一个学期,就是对LPS没反应,查了好多资料,换了LPS,血清,检测NO试剂盒,这学期用的是5%的血清养的细胞,实验前进行了饥饿处理,还是不行,打电话问细胞库的老师,老师说可能是细胞变异了,我去,细胞变异了,我还做个毛线,唉,惆怅中,可是我一个同学用的就是我的这个细胞做实验,各项因子检测结果都挺好,上学期也用LPS刺激过,没有效果,以为LPS有问题,还换了家试剂公司,看这情况,估计是细胞有问题了,3小时,6小时,24小时都测过了,6小时时稍微高一点点,还有一个现象就是,空白对照组,不加任何药物刺激,测出来的NO含量也高好多,4uM左右,以前师兄师姐做得空白组一般是2uM,LPS刺激组8UM左右,我现在做出来LPS和空白对照组的差不多,有时候甚至更低。
不知道你现在是如何解决的,可以交流交流嘛?
15楼2014-03-18 15:23:53
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sl35537417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
淼淼好孩子(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-30 10:11:54
LPS诱导炎症 用BV2细胞 大概只处理15min 就会有很强的信号 ;你这明显是处理时间太长  信号早已经过去很久很久很久了
2楼2013-05-27 14:36:47
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淼淼好孩子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sl35537417 at 2013-05-27 14:36:47
LPS诱导炎症 用BV2细胞 大概只处理15min 就会有很强的信号 ;你这明显是处理时间太长  信号早已经过去很久很久很久了

我看文献上用的都是这个模型的细胞,所以我是应该选取短的时间点去测对么?
3楼2013-05-27 15:51:37
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sl35537417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是的  时间梯度很重要
4楼2013-05-27 16:04:25
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