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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求碱性蛋白native-page配方及电泳方法
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-17 10:59:06
非变性凝胶电泳中，样品蛋白质的PH是重要的影响因素，要根据样品蛋白质的pI值来选定合适的电泳缓冲溶液，电泳缓冲溶液的pH只应该高于样品蛋白质的pI值。目的蛋白质的等电点已经是在8+，缓冲溶液PH值到8.8 也就到极限 ...

SDS-PAGE是有条带的，我不是用非变性胶分离纯化也不是看纯度，是要看有没有形成多聚体
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11楼2013-06-19 08:50:29
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

要检测是否形成多聚体可以用分子筛层析结合SDS-PAGE检测出来，用MADLI-MS可以直接检测出多聚体或者蛋白质-蛋白质相互作用。
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12楼2013-06-20 11:48:10
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

MIE Vol-402 Biological Mass Spectrometry(2005,)Free,论坛附件上传，下载快 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5880521
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13楼2013-06-20 11:50:43
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-20 11:48:10
要检测是否形成多聚体可以用分子筛层析结合SDS-PAGE检测出来，用MADLI-MS可以直接检测出多聚体或者蛋白质-蛋白质相互作用。

您说的这么我不是很明白，可不可以说的再详细一点？！我们这边有个凝胶柱，是分子排阻，不知道您有没有用过？！
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14楼2013-06-21 08:45:56
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2013-06-21 08:45:56
您说的这么我不是很明白，可不可以说的再详细一点？！我们这边有个凝胶柱，是分子排阻，不知道您有没有用过？！...

分子筛层析我用过，你想问什么？
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15楼2013-06-21 10:51:40
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ryc1989

新虫 (初入文坛)
请问楼主，那个碱性蛋白的上样缓冲液怎么配制啊？是直接把甲基绿加到蛋白样品里面（终浓度0.002%），然后点样吗？我准备做碱性蛋白的Page。可是还不知道怎么配制。怎么弄。很着急
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16楼2014-08-26 17:13:30
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bishopsleeve

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主是怎么交换电极方向的？我的蛋白等电点未知，试了酸性蛋白的非变性电泳，我的蛋白都在顶部，想换成碱性蛋白的，但不知道怎么交换电极方向，求楼主赐教
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17楼2015-03-22 13:28:19
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