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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 暗室曝光胶片一放上去然后条带中间就变成黑色的了，是什么原因
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forever909

银虫 (小有名气)

[求助] 暗室曝光胶片一放上去然后条带中间就变成黑色的了，是什么原因

最近在做暗室曝光，发现一个问题，每次膜上涂上发光液以后，会出现很清晰的条带，然后把膜放在暗夹以后，盖上胶片，就会发现本来很亮的条带突然就不亮了，尤其是每个条带的中心部位就会灭掉，请问一下是什么原因呢
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快乐是最重要的。。。。。。
1楼 2013-05-25 08:49:00
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晓学究

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
forever909(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-25 22:27:10
是不是你的抗体量太大，发光液淬灭的快了，和放不放胶片没关系吧。
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锻炼，饮食，计划，幸福
2楼2013-05-25 10:43:20
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
forever909(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-25 22:27:27
信号太强了，然后底物很快被消耗光了，所有就没有信号了。

建议减少上样量。
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3楼2013-05-25 18:37:41
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shishun2008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
forever909(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-25 22:27:55
我认为是一抗的问题  可能是没有杂上一抗 而出现“中心部位就会灭掉”的现象 我也遇到这样的情况 我从暗室出来再次加ECLA B 液 还是没出现  最后用一抗二抗去除液洗完后  再封闭 第二天就很好了 试试看 ————经验 仅供参考 呵呵
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4楼2013-05-25 21:48:06
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
能不能说一下你的操作过程，你膜涂上ECL液后，有用膜封上吗？
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2013-05-25 22:29:08
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forever909

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晓学究 at 2013-05-25 10:43:20
是不是你的抗体量太大，发光液淬灭的快了，和放不放胶片没关系吧。

抗体量太大是什么意思啊，是浓度太高么，还是蛋白表达量太高了啊
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快乐是最重要的。。。。。。
6楼2013-05-25 23:39:50
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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forever909: 金币+2 2013-05-26 08:33:48
抗体使用量大了，少使用抗体（一般1:10000）。抗体多了后其底物快速反应完了。
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7楼2013-05-26 06:16:32
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forever909

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gyesang at 2013-05-25 22:29:08
能不能说一下你的操作过程，你膜涂上ECL液后，有用膜封上吗？

我是用薄膜盖在上面的
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快乐是最重要的。。。。。。
8楼2013-05-26 08:32:29
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forever909

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-05-26 06:16:32
抗体使用量大了，少使用抗体（一般1:10000）。抗体多了后其底物快速反应完了。

这样子啊，我那下次把浓度调低一点，谢了
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快乐是最重要的。。。。。。
9楼2013-05-26 08:33:11
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