应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于目的基因不同向连接到T载体上的问题
202/2返回列表上一页12
查看: 2894  |  回复: 19
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by nepwisil at 2013-05-27 19:02:40
哇你好厉害，请问怎么算出这个概率的，教一下~然后T载体mcs两端是sp6和T7的启动子，我转化用的是dh5a，不含有这两种启动子对应的RNA聚合酶...

楼主, T载体克隆长出蓝的还是长出白的菌落和sp6/T7没有任何关系.....
赞一下 回复此楼
11楼2013-05-27 19:54:08
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nepwisil

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
12楼2013-05-27 20:11:22
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by nepwisil at 2013-05-27 20:11:22
我知道没关系，你没明白我的意思。我插入的片段有400多，只要插入一定会发生a互补，不可能出现在蓝斑里面。因为没法转录的缘故，所以这段基因不论是哪个方向接入都不应该对菌的生长构成威胁，所以……我也不懂为什 ...

如果你的基因连进去后没有破坏β-半乳糖苷酶的阅读框, 再加上如果这个基因在β-半乳糖苷酶阅读框里没有终止子, 融合蛋白又不破坏β-半乳糖苷酶的结构. 这个菌落就是蓝色的.
赞一下 回复此楼
13楼2013-05-27 20:20:46
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nepwisil

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
14楼2013-05-28 10:15:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-30 21:44:16
六个阅读框里都有终止密码子? 这样的话我也想不出为什么连接的时候有方向性了.
在连T载体的时候出现这种情况是很小概率的事件, 生物实验的东东, 如果一百个人用只有两三个人出问题那我们会认为这是个好产品对吧?
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2013-05-28 15:36:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nepwisil

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
16楼2013-05-30 21:23:24
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
以前上实验课教的, 个人没有碰到过. 因为我用T载体时还没有出现需要考虑方向的, 所以一般都挑很少的几个白克隆就行了, 你的这种情况需要挑很多克隆才会被发现. 真心希望楼主分析一下阅读框给个反馈哈!
赞一下 回复此楼
17楼2013-05-30 22:29:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengbiotech

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主你好，我现在也遇到了同样的问题，请问你现在解决了吗？是什么原因导致连接方向一致的？
赞一下 回复此楼
热爱生活，热爱生命
18楼2013-09-04 09:50:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随波逐刘

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我用的也是pgem-t载体，做的是差异基因，转化后，筛了500个克隆送测序，有一个反方向的，估计是意外吧，，，应该都是一个方向的，
赞一下 回复此楼
19楼2013-09-04 10:56:29
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sccs1046

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我现在也遇到了这样的现象，不知道是什么原因啊！！！
赞一下 回复此楼
20楼2013-12-30 19:00:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nepwisil 的主题更新
202/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭