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求助，关于cox-2酶催化花生四烯酸的问题
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老板的一个项目，其中有一部需要测定酶活。参照文献，使用cox-2酶催化花生四烯酸，检测花生四烯酸的减少量，但实验进行了几十次，也调整了一些方案，一直没有得到理想结果。花生四烯酸含量未见减少，只有其中3次花生四烯酸被反应掉了。下面是我的一些步骤，请各位大神看下有没有什么疏漏。 血红素+肾上腺素+tris-HCl混匀后加入cox-2酶，常温孵化2min。再加入aa，5% CO2 37摄氏度培养30min，加入HCL终止反应。进液相，看aa色谱峰面积的减少。 如果一直做不出结果也就罢了，可是偶尔能做出来是怎么回事~~好纠结~~拜托各位了！ |
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