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edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

再2m尿素的时候加入0.5M arg试试呢，可以抑制聚集沉淀。
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11楼2013-05-24 15:07:31
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475502411

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Allen206 at 2013-05-24 13:34:38
能做上清就做上清啊，包涵体不是一般的困难，现在好像还没有人能突破，还是想办法做上清吧

但是纯化不了不知道怎么办？就呆了His标签
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
12楼2013-05-24 15:25:30
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475502411

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-24 13:59:39
可以低浓度复兴后再浓缩啊...

嗯，我现在正在用您给我说的办法，复性应该是成功的，下周检测一下活性就浓缩一下，谢谢
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
13楼2013-05-30 11:52:32
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edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by 475502411 at 2013-05-30 11:52:32
嗯，我现在正在用您给我说的办法，复性应该是成功的，下周检测一下活性就浓缩一下，谢谢...

嘿嘿，千万别“您您”的哎，折我寿
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475502411
14楼2013-05-30 11:54:53
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生物小通

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
475502411: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-06-03 10:49:34
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-06-03 18:16:14
引用回帖:
7楼: Originally posted by 475502411 at 2013-05-24 11:16:57
是通过ELISA和胶体金确定的蛋白活性
想请教一下，磁珠纯化时怎么样的，能不能具体说说，或者给点资料什么的，我们实验室真没做过，我还是第一次听说呢
谢谢...

你看看promage的，非常简单，就是效率低点。基本上裂解细菌后离心上清，与磁珠混匀孵育一段时间，用磁铁把磁珠洗在一旁，倒掉上清，加入漂洗液混匀洗几次，加上洗脱液洗一下就行了，非常方便，就是可溶的效率有点低。
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475502411
学习，进步
15楼2013-05-30 16:59:24
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475502411

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 生物小通 at 2013-05-30 15:59:24
你看看promage的，非常简单，就是效率低点。基本上裂解细菌后离心上清，与磁珠混匀孵育一段时间，用磁铁把磁珠洗在一旁，倒掉上清，加入漂洗液混匀洗几次，加上洗脱液洗一下就行了，非常方便，就是可溶的效率有点低 ...

好的，我看看，没有标标签也行吗？我的标签貌似被包裹在内部了
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
16楼2013-06-03 10:49:24
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475502411

铜虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-30 10:54:53
嘿嘿，千万别“您您”的哎，折我寿...

呵呵，谢谢你
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
17楼2013-06-03 10:50:19
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475502411

铜虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by 生物小通 at 2013-05-30 15:59:24
你看看promage的，非常简单，就是效率低点。基本上裂解细菌后离心上清，与磁珠混匀孵育一段时间，用磁铁把磁珠洗在一旁，倒掉上清，加入漂洗液混匀洗几次，加上洗脱液洗一下就行了，非常方便，就是可溶的效率有点低 ...

你确定你说的是promage公司，我怎么没有找到产品的相关信息呢？不知道能方不方便，能不能给我个连接或者是说明书什么的？谢谢
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
18楼2013-06-03 12:05:18
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roomofxw

木虫 (正式写手)
打酱油随便说说的
有这么多二硫键，复性液里面也没看见GSH/GSSH。是用空气氧化么？那是不是天热了，溶氧低了
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19楼2013-06-03 15:02:48
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生物小通

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
475502411(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-06-03 18:16:30
引用回帖:
18楼: Originally posted by 475502411 at 2013-06-03 12:05:18
你确定你说的是promage公司，我怎么没有找到产品的相关信息呢？不知道能方不方便，能不能给我个连接或者是说明书什么的？谢谢...

http://www.promega.com.cn/Produc ... p;amp;Pro_Class=252
http://www.promega.com.cn/Produc ... amp;PostType=Detail
根据具体情况调整各个纯化系数，像我，每次纯化20ml菌，裂解液（稀释）1ml左右，磁珠量不变（25-30ul吧）。
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学习，进步
20楼2013-06-03 17:56:34
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