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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫沉淀后进行western blot 应该有几条带？
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8601

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by jack6335 at 2013-05-25 20:50:26
为了回复帖子凌晨还不休息，多谢多谢啊...

我在国外，你们凌晨是我们中午，呵呵。
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11楼2013-05-26 13:40:13
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8601

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by jack6335 at 2013-05-25 20:48:09
我做的抗体对照在WB之后就只有50kD处有带，你太牛了！...

那要看你跑的胶了。要是你把25KD的带子跑走了，那哪还看得见。
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12楼2013-05-26 13:40:54
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 8601 at 2013-05-26 13:40:13
我在国外，你们凌晨是我们中午，呵呵。...

我不会逆向思维
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砖石王老三！！！
13楼2013-05-26 13:47:17
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 8601 at 2013-05-26 13:40:54
那要看你跑的胶了。要是你把25KD的带子跑走了，那哪还看得见。...

胶考染后能看到两条带的！
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砖石王老三！！！
14楼2013-05-26 13:48:38
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生物小通

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by jack6335 at 2013-05-26 13:48:38
胶考染后能看到两条带的！...

因为抗体的Fc片段由重链组成，再加上那个部位与种属相关（好似是，记不清了），所以一般的二抗就是抗这个部位的。
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学习，进步
15楼2013-05-27 11:38:27
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 生物小通 at 2013-05-27 11:38:27
因为抗体的Fc片段由重链组成，再加上那个部位与种属相关（好似是，记不清了），所以一般的二抗就是抗这个部位的。...

嗯嗯嗯嗯。。。
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砖石王老三！！！
16楼2013-05-27 14:34:36
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生物小通

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 8601 at 2013-05-24 01:02:37
我们实验室有一种二抗叫 conjugated proteinA. 这种抗体据老板说只识别有活性的抗体不识别变性的。但我做实验的经验是如果免疫沉淀时放的抗体比较多，还是会识别的，但确实要比一般的弱些。...

你们实验室真有钱，呵呵，这个二抗真不晓得，只知道SPA是与Fc片段特异结合的，不知道他们连接的是不是这个蛋白。抗体加多的话都会有一定的非特异性条带，当然这个还要看他们的稀释度、孵育时间、稀释液等
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学习，进步
17楼2013-05-27 17:31:00
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