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843157767

新虫 (初入文坛)

[求助] 银染技术 已有1人参与

请问我银染是为什么背景老这么黑啊？

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1楼 2013-05-16 11:50:58
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wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
843157767: 回帖置顶 2013-05-17 11:40:56
时间控制的不好，另外，缓冲液干净点，包括配置溶液全部用去离子水。
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2楼2013-05-16 12:30:23
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普通回帖

843157767

新虫 (初入文坛)
还有就是为什么泳道托的那么严重，我做的是AFLP
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3楼2013-05-16 14:37:30
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zhuangbj

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

背景太深：
a. 显色时间过长。通常显色反应会在10分钟内结束，显色反应时间过长会导致背景很深。
b. 洗涤不充分。洗涤时间过短，或洗涤液加入的量不足，或者容器过于狭小导致摇动时溶液不易充分混合，或摇动速
度过慢，导致混匀不充分。请按照说明书的建议确保各种溶液的用量和作用时间，摇床的推荐速度为60-70rpm。
c. 凝胶中原有的缓冲液等未在固定步骤中去除干净。一方面需确保固定的时间和固定液的用量，另一方面对于不是最
常用的Bis-Tris缓冲的凝胶需要更长的固定时间以充分去除凝胶中的原有缓冲成分，以降低背景。
d. 水的纯度太低。需使用大于16 MΩ·cm的高纯度水。
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4楼2014-04-02 15:27:34
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