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wubingqi
铁杆木虫 (小有名气)
- MicEPI: 1
- 应助: 79 (初中生)
- 金币: 5268.4
- 散金: 10
- 红花: 15
- 帖子: 242
- 在线: 514.9小时
- 虫号: 1049797
- 注册: 2010-06-30
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
2楼2013-05-16 12:30:23
3楼2013-05-16 14:37:30
【答案】应助回帖
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背景太深： a. 显色时间过长。通常显色反应会在10分钟内结束，显色反应时间过长会导致背景很深。 b. 洗涤不充分。洗涤时间过短，或洗涤液加入的量不足，或者容器过于狭小导致摇动时溶液不易充分混合，或摇动速 度过慢，导致混匀不充分。请按照说明书的建议确保各种溶液的用量和作用时间，摇床的推荐速度为60-70rpm。 c. 凝胶中原有的缓冲液等未在固定步骤中去除干净。一方面需确保固定的时间和固定液的用量，另一方面对于不是最 常用的Bis-Tris缓冲的凝胶需要更长的固定时间以充分去除凝胶中的原有缓冲成分，以降低背景。 d. 水的纯度太低。需使用大于16 MΩ·cm的高纯度水。  |
4楼2014-04-02 15:27:34
