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沫语秋沿

铁虫 (初入文坛)

[求助] DGGE电泳银染后出现重影 怎么办怎么办呢 SOS!!! 已有2人参与

各位做DGGE 做银染的大侠们 最近做DGGE电泳银染后总是会出现重影 一条条带成了两条 都没办法切胶回收
细菌V3-V5区 195bp
电泳条件:40-70% 8%胶 50V 1h 100V 8.5h 1*TAE
染色方法:0.1% AgNO3 染色10min
2% NaOH和0.04%NaHCO3 4℃预冷水染色时配制显色液(显色前加1.5ml 甲醛)显色5-10min
下面上图

DSCN1390.JPG
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如有来生 愿鲁且愚
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donggualily

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

请问你最后解决了吗?我现在也遇到这样的情况,真是头疼,听说可能是电压不恒定的原因,但是我同时上的了板胶,其中 一板有重影,一板没有,这是怎么回事呢?求赐教,谢谢!
3楼2014-01-17 12:30:36
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jxmingcyl

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你有没有及时用预冷的10%冰醋酸终止显色呀?
2楼2013-07-24 16:25:20
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donggualily

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

此外,我看你的胶完全没有样品侧漏的现象,我现在做DGGE,每次都有样品侧漏,在邻近没有上样的泳道也能出现一些条带,大侠指点一下吧,万分感激!
4楼2014-01-17 12:32:21
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ltfe567

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你好亲,你的泳道颜色挺浅的,我的特别深,想咨询下你,请问你的银染配方是什么,能给我下么,谢谢!
5楼2014-05-12 16:43:02
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