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皮皮1871

新虫 (小有名气)

[求助] 胶乳偶联出现沉淀,请高手指点

我的羧基聚苯乙烯胶乳微球用EDC偶联抗体,当时没有出现沉淀,但隔夜后出现沉淀是什么原因?而且随着加入抗体量的增加,沉淀量也增多?觉得匪夷所思。请高手们帮忙分析下。
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不管梦想有多远,不停地走下去
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cliang_scau

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
皮皮1871: 金币+2, 有帮助 2013-05-20 09:17:41
是不是抗体加入偶联Buffer后由于pH、离子强度的变化造成蛋白沉淀了?
2楼2013-05-16 10:34:15
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cliang_scau

铜虫 (初入文坛)

是不是抗体加入偶联Buffer后由于pH、离子强度的变化造成蛋白沉淀了?
3楼2013-05-16 10:34:32
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
皮皮1871: 金币+8, ★★★很有帮助 2013-05-20 09:17:27
是羧基聚苯乙烯胶乳微球发生了自偶联,建议:
1.减低EDC含量
2.改变缓冲体系
3.调整羧基聚苯乙烯胶乳微球、EDC、抗体偶联时间
4.调整离心速度
云山苍苍,江水泱泱,先生之风,山高水长
4楼2013-05-17 08:43:14
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皮皮1871

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 159236478 at 2013-05-17 08:43:14
是羧基聚苯乙烯胶乳微球发生了自偶联,建议:
1.减低EDC含量
2.改变缓冲体系
3.调整羧基聚苯乙烯胶乳微球、EDC、抗体偶联时间
4.调整离心速度

请问离心速度是应降低还是升高呢?
不管梦想有多远,不停地走下去
5楼2013-05-20 09:18:44
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

降低,速度越低,乳胶颗粒发生个体碰撞的机会越少!
云山苍苍,江水泱泱,先生之风,山高水长
6楼2013-05-21 14:06:53
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ty10086

捐助贵宾 (小有名气)


哥,你的抗体多了,其它因素不变,降低抗体浓度。
这个正常,多余的抗体自己和自己杂交形成“多聚体”沉淀下来了。
7楼2013-07-15 10:12:01
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duweiweixiao

新虫 (初入文坛)

问题解决了吗,怎么处理的,谢谢!
8楼2014-04-21 09:11:30
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问情问天

银虫 (小有名气)

你当时问题解决没?
9楼2014-11-19 12:42:14
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fj89lana

新虫 (初入文坛)

请问大神,你出现的这个问题解决没?我现在也遇到了同样的问题,望大神指点。
10楼2016-01-13 13:31:10
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