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njutjhy

铜虫 (小有名气)

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[求助] 关于不同的宿主

同一个酶基因在原核和真核宿主中所表达的酶，酶学性质相同么（比如最适温度、pH、温度稳定性、pH稳定性）？会不会由于宿主不同，导致酶蛋白的折叠不一样？

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冷眼看世间冷暖，笑谈人生得失

1楼 2013-05-13 17:53:07

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ynkuaile

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
njutjhy: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2013-05-14 16:38:37

引用回帖:

12楼: Originally posted by njutjhy at 2013-05-14 14:06:54
之前在不同文献中看到相同的基因在不同的宿主，比如真核宿主和原核宿主表达，虽然原核的宿主表达产量高，但是酶学性质却不如在大肠杆菌中的好。所以我就好奇究竟是因为不同的宿主表达相同基因具有先天的差异性还是 ...

个人意见：如果不同宿主纯化的酶，在相同溶液，相同纯度，相同温度及底物浓度的情况下，酶活相差不大，我觉得可以忽略这个差别，因为蛋白浓度及实验方面会有误差。如果相差很大，那大有可能是宿主的原因。不同宿主是有先天差异的。我们现在用的大肠杆菌也是改造过的工程菌，其启动子一般都比真核的要强。酶活力不同可能和真核生物的修饰有关，也有可能会和酶的辅酶辅基等辅因子相关。营养不一样表达的蛋白也有差别。具体我觉得要看蛋白，如果蛋白只是氨基酸肽段，那么原核表达与真核表达的差别就在于真核可以在某些位点修饰，真核有一些分子伴侣帮助折叠，真核细胞内的氧化还原环境可能更有助于某些二硫键。如果含有某些辅酶，不是单一氨基酸序列的蛋白，我觉得营养差异是关键，仅供参考。