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szxlily

银虫 (小有名气)

[求助] 麦氏比浊法确定大肠杆菌的数量

最近我在做MIC实验,想了解下用麦氏比浊法确定大肠杆菌浓度的方法。我的培养方法是,挑取单菌落,接种于5ml的MH肉汤,37度摇菌过夜。次日再取过夜的菌液50ul,加入到5ml的MH肉汤中,摇菌2.5h,使其处于对数生长期。接下来就要用麦氏比浊法确定大肠杆菌的浓度了,因为没有做过,所以想请教一下各位前辈。谢谢
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carrieskl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助! 2013-05-13 19:40:42
szxlily: 金币+3 2013-05-14 15:06:51
比浊管不是总共6支么,摇匀。
把你的菌液放在跟比浊管一样粗细的管里,然后看它的浊度跟麦氏管哪支相同。
跟比浊管的说明书对照一下就知道近似浓度了。
ps 如果觉得直接看浓度不好确定,可以在纸上画若干条平行的粗黑线当做比浊的背景,看透过管子后黑线的能见度就好了。
争做医生中最好的厨子
2楼2013-05-12 16:34:48
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hao28153

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助! 2013-05-13 19:41:01
szxlily: 金币+2 2013-05-14 15:06:46
我都是在平板上画菌,培养过夜,第二天用灭菌生理盐水洗脱,然后对照麦氏比浊管确定菌液大致浓度,麦氏比浊管你应该知道,10号30亿,9号27亿,8号24亿,依次下去,用肉汤培养的菌你在确定菌液浓度时有肉汤干扰,注射时也不好,所以建议用平板培养。如果菌体本身有颜色,使得洗脱的菌液较浑浊,不好肉眼比较就在白纸上画黑线,做背景比较,希望上面说的对你有望助
3楼2013-05-13 12:47:41
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