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海里的水泡

木虫 (小有名气)

[求助] 如何有效降低丝状真菌产抗生素过程中极易染菌的问题?

目前在做一种海洋丝状真菌的抗生素摇瓶发酵,由于该菌种子培养时间要4-5天,发酵时间要11天以上,做了很多批实验,大部分是染菌的。染菌的直接结果就是产量下降或者没有产量。在过程中镜检发现,在显微镜下菌丝和杂菌(主要是细菌)都有生长。
由于目前使用的天然培养基,所以培养基中有很多类似豆粉之类的固形物的存在。灭菌的时候已经额外延长了灭菌时间。
由于目前做不到很纯的液体种子,所以种子都是从固体平板上挑取单菌落来进行培养的。
不知道有没有什么比较好的方法能减少染菌几率?
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江湖笑

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
海里的水泡: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-14 09:57:44
建议做下菌种纯化吧,合适倍数下平板稀释涂布,挑单菌落摇瓶培养,菌落不需要长到很大,否则会偏老。培养基开始粘稠时保存到若干支到甘油管中,-20度保存,可以接发酵摇瓶验证种子。上罐的时候可以甘油管接种到种子瓶。进罐时可以按40mg/L发酵培养基的比例加过滤除菌的卡那霉素水溶液。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2013-05-13 17:14:33
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江湖笑

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 海里的水泡 at 2013-05-14 09:59:38
想咨询下加氨苄是不是也可以?...

我没用过氨苄,不好给个明确答复,不过你可以查查文献资料,再试试看
11楼2013-05-14 12:27:17
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