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马龙sweeting

木虫 (正式写手)

[求助] 最近在用罗丹明荧光染色细胞微丝蛋白F-actin,有几个问题想请教大家~~

最近在用罗丹明荧光染色细胞微丝蛋白F-actin。看到很多文献上在使用罗丹明或鬼笔环肽荧光染色细胞微丝结构时,都是饥饿处理一段时候再用药物短时处理,我对此表示不明白。请各位高手特别是做过这个的帮忙给分析解答一下,1、先必须要饥饿处理吗?  2、饥饿处理后再用药物处理必须改用短时处理吗,因为我以前处理都是长时间的,会不会是因为我的药物过氧化氢太容易分解了或者别的原因,才使得在这个实验中必须要短时处理,如果我长时间处理可以吗~~
请做过类似实验或者有这方面经验的高手帮忙解答一下~~不胜感激~~
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

饥饿处理是为了细胞全部处于静止期吧,这样子细胞都处于同一个起跑线上, 然后给药。这样能更正确反应mRNA和蛋白的表达变化情况吧~
2楼2013-05-10 08:55:30
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马龙sweeting

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by czcpudai at 2013-05-10 08:55:30
饥饿处理是为了细胞全部处于静止期吧,这样子细胞都处于同一个起跑线上, 然后给药。这样能更正确反应mRNA和蛋白的表达变化情况吧~

请问饥饿处理多长时间合适呢~~我看到1到6小时的都有,还有人饥饿处理24小时~~
3楼2013-05-10 11:02:11
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-05-11 18:51:06
根据文献来做吧,有24小时的,还有12小时的,如果后续试验时间不长,可以无血清处理24小时,这样更好些,如果后续试验时间较长,可以处理时间短些,确保细胞不能被饿死~
4楼2013-05-11 08:47:03
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xueruyue

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

看你的实验具体来定,不一定非要饥饿,也可以用饥饿和非饥饿做一个对比预实验来看下差别。
5楼2013-05-17 12:11:48
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