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snake-M

新虫 (初入文坛)

[求助] cck8实验遇到的有关问题

最近才开始做cck8.实验,也看了很多这方面的帖子。但还是有几个问题不明白,希望跟大家交流一下

1,检测时间问题:我一直认为只要掌握好自己细胞的接种量,完全不用0.5h 1h 2h 3h 分别测定吸光度值吧?因为活 细胞线粒体的脱氢酶就在那个孔里,不多不少,为什么不直接三个小时后或者直接四个小时检测最大量呢,如果值偏 大就知道下次少接种了呗?不知道我想的对否?请大家赐教
2,如果有氧化剂存在的情况下,,,比如金属离子,那么在加入不同浓度作用物,培养24小时48小时之后,该怎么 做? A.提前设定一组只要药物的对照组的前提下,直接加入cck8,计算的时候减去对照组。?B,析出药物,换同 等量培养基 再加入cck8?哪一个会好一点呢?

有个学姐再做这方面实验,她的方法是,直接把带还原剂的培养液加药物吸弃,孔里什么都没有,直接加cck8孵育四 小时这样的,结果也能达到预期,,,,我有点不知道该怎么做了,请大家帮忙分析一下,也许是我想错了,或者怎样 的。 希望大家帮忙,谢谢了
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A3330

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

CCK8做时间不同,是要根据自己试验调整的,因为显色是一个过程,需要时间。同时酶标仪的检查如太小,误差可能就比较大咯。
以前的文艺青年,现在成屌丝了!God bless us.
3楼2013-05-24 16:47:44
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susan6969

铁虫 (初入文坛)

2种方法都可以。方法1省时间。方法2更可靠。
第一次做可以两种方法比较一下,又不麻烦。
2楼2013-05-14 17:10:49
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华农夏田

铁虫 (正式写手)

跟你讨论哈:我打算做个双氧水诱导心肌细胞的毒性试验,想摸索双氧水的最佳诱导浓度,但诱导时间也是个问题额,想设6个浓度梯度,再掐住时间,确定诱导凋亡的最佳浓度。看了帖子,想必CCK8测细胞活力还要考虑细胞接种密度(12H贴壁)等等,我这个方法可行么?望指点啊!
要科研也要生活
4楼2013-08-28 10:40:17
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华农夏田

铁虫 (正式写手)

跟你讨论哈:我打算做个双氧水诱导心肌细胞的毒性试验,想摸索双氧水的最佳诱导浓度,但诱导时间也是个问题额,想设6个浓度梯度,再掐住时间,确定诱导凋亡的最佳浓度。看了帖子,想必CCK8测细胞活力还要考虑细胞接种密度(12H贴壁)等等,我这个方法可行么?望指点啊!
要科研也要生活
5楼2013-08-28 10:41:16
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