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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求使用超滤膜或者透析袋浓缩蛋白质的具体标准方法
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xingyel

木虫 (小有名气)

[求助] 求使用超滤膜或者透析袋浓缩蛋白质的具体标准方法

求超滤膜或透析袋浓缩蛋白质的具体方法。10ug/mL能浓缩么？超滤膜哪家比较好？透析袋是买的还是自己做的？如果是自己做的，求具体方法。拜谢啊~~
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1楼2013-05-09 18:54:22
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Dionysius

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xingyel: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-10 11:37:31
用超滤管吧，用离心的方法透析和超滤，速度会比较快
超滤管很多公司都有卖的，根据自己蛋白的大小选择相应的孔径就好
我们实验室一直用Millipore的，很好用，超滤之后都是1mg/mL以上的，推荐一下
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2楼2013-05-09 22:26:54
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xingyel

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Dionysius at 2013-05-09 22:26:54
用超滤管吧，用离心的方法透析和超滤，速度会比较快
超滤管很多公司都有卖的，根据自己蛋白的大小选择相应的孔径就好
我们实验室一直用Millipore的，很好用，超滤之后都是1mg/mL以上的，推荐一下

请问大概价格是多少啊？
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3楼2013-05-10 11:37:46
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xingyel

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Dionysius at 2013-05-09 22:26:54
用超滤管吧，用离心的方法透析和超滤，速度会比较快
超滤管很多公司都有卖的，根据自己蛋白的大小选择相应的孔径就好
我们实验室一直用Millipore的，很好用，超滤之后都是1mg/mL以上的，推荐一下

请问17KD的蛋白用10KD的超滤管还是30KD的？
怎样清洗较好？
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4楼2013-05-10 13:49:20
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Dionysius

木虫 (小有名气)
★ ★
wizardfan: 金币+2, thanks for sharing the experience 2013-05-10 23:28:44
引用回帖:
4楼: Originally posted by xingyel at 2013-05-10 13:49:20
请问17KD的蛋白用10KD的超滤管还是30KD的？
怎样清洗较好？...

17KD的蛋白最好用10KD的超滤管
清洗？你指的是超滤管使用前吗，我们一般直接用超纯水洗就可以。用完之后再用超纯水洗几遍，泡在20%乙醇中下次继续用。
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5楼2013-05-10 14:05:39
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xingyel

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Dionysius at 2013-05-10 14:05:39
17KD的蛋白最好用10KD的超滤管
清洗？你指的是超滤管使用前吗，我们一般直接用超纯水洗就可以。用完之后再用超纯水洗几遍，泡在20%乙醇中下次继续用。...

太感谢了！
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6楼2013-05-10 14:16:57
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linwenbin

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xingyel: 金币+5, ★有帮助 2013-05-19 22:39:36
用10KD的聚砜超滤膜效果比较好
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7楼2013-05-18 15:58:25
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nixilu110

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xingyel: 金币+5, ★有帮助 2013-05-19 22:39:43
超滤管大概30-40元一个
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冷风吹我醒
8楼2013-05-18 20:56:32
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liangfurui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Dionysius at 2013-05-09 22:26:54
用超滤管吧，用离心的方法透析和超滤，速度会比较快
超滤管很多公司都有卖的，根据自己蛋白的大小选择相应的孔径就好
我们实验室一直用Millipore的，很好用，超滤之后都是1mg/mL以上的，推荐一下

我的蛋白质是未知的，不知道大小怎么选择超滤管呢？谢谢啦
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加油
9楼2013-12-12 16:06:06
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Dionysius

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by liangfurui at 2013-12-12 16:06:06
我的蛋白质是未知的，不知道大小怎么选择超滤管呢？谢谢啦...

可以先跑一个SDS-PAGE就可以知道大概的分子量了，然后就可以选择合适的超滤管；如果蛋白浓度实在太低的话，可以先用截留较小的超滤管（10K或者3K)浓缩，然后再跑SDS-PAGE。
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10楼2013-12-14 00:15:20
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