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xingyel

木虫 (小有名气)

[求助] 求使用超滤膜或者透析袋浓缩蛋白质的具体标准方法

求超滤膜或透析袋浓缩蛋白质的具体方法。10ug/mL能浓缩么?超滤膜哪家比较好?透析袋是买的还是自己做的?如果是自己做的,求具体方法。拜谢啊~~
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Dionysius

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xingyel: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-10 11:37:31
用超滤管吧,用离心的方法透析和超滤,速度会比较快
超滤管很多公司都有卖的,根据自己蛋白的大小选择相应的孔径就好
我们实验室一直用Millipore的,很好用,超滤之后都是1mg/mL以上的,推荐一下
2楼2013-05-09 22:26:54
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xingyel

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Dionysius at 2013-05-09 22:26:54
用超滤管吧,用离心的方法透析和超滤,速度会比较快
超滤管很多公司都有卖的,根据自己蛋白的大小选择相应的孔径就好
我们实验室一直用Millipore的,很好用,超滤之后都是1mg/mL以上的,推荐一下

请问大概价格是多少啊?
3楼2013-05-10 11:37:46
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xingyel

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Dionysius at 2013-05-09 22:26:54
用超滤管吧,用离心的方法透析和超滤,速度会比较快
超滤管很多公司都有卖的,根据自己蛋白的大小选择相应的孔径就好
我们实验室一直用Millipore的,很好用,超滤之后都是1mg/mL以上的,推荐一下

请问17KD的蛋白用10KD的超滤管还是30KD的?
怎样清洗较好?
4楼2013-05-10 13:49:20
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Dionysius

木虫 (小有名气)

★ ★
wizardfan: 金币+2, thanks for sharing the experience 2013-05-10 23:28:44
引用回帖:
4楼: Originally posted by xingyel at 2013-05-10 13:49:20
请问17KD的蛋白用10KD的超滤管还是30KD的?
怎样清洗较好?...

17KD的蛋白最好用10KD的超滤管
清洗?你指的是超滤管使用前吗,我们一般直接用超纯水洗就可以。用完之后再用超纯水洗几遍,泡在20%乙醇中下次继续用。
5楼2013-05-10 14:05:39
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xingyel

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Dionysius at 2013-05-10 14:05:39
17KD的蛋白最好用10KD的超滤管
清洗?你指的是超滤管使用前吗,我们一般直接用超纯水洗就可以。用完之后再用超纯水洗几遍,泡在20%乙醇中下次继续用。...

太感谢了!
6楼2013-05-10 14:16:57
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linwenbin

铁虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xingyel: 金币+5, 有帮助 2013-05-19 22:39:36
用10KD的聚砜超滤膜效果比较好
7楼2013-05-18 15:58:25
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nixilu110

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xingyel: 金币+5, 有帮助 2013-05-19 22:39:43
超滤管大概30-40元一个
冷风吹我醒
8楼2013-05-18 20:56:32
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liangfurui

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Dionysius at 2013-05-09 22:26:54
用超滤管吧,用离心的方法透析和超滤,速度会比较快
超滤管很多公司都有卖的,根据自己蛋白的大小选择相应的孔径就好
我们实验室一直用Millipore的,很好用,超滤之后都是1mg/mL以上的,推荐一下

我的蛋白质是未知的,不知道大小怎么选择超滤管呢?谢谢啦
加油
9楼2013-12-12 16:06:06
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Dionysius

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by liangfurui at 2013-12-12 16:06:06
我的蛋白质是未知的,不知道大小怎么选择超滤管呢?谢谢啦...

可以先跑一个SDS-PAGE就可以知道大概的分子量了,然后就可以选择合适的超滤管;如果蛋白浓度实在太低的话,可以先用截留较小的超滤管(10K或者3K)浓缩,然后再跑SDS-PAGE。
10楼2013-12-14 00:15:20
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