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胖虎金虫 (正式写手)
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[求助]
酶动力学
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求教给位大侠，酶动力学中吸光度怎么转换成反应速度。 还有我在确定抑制剂抑制类型的试验中，我的底物浓度跟酶浓度以及他们的量怎么确定？ 是否会影响我的Km跟Ki？ |
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胖虎
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大侠，我看了一下，你看下面这个可行吗？ 根据Lamber t- Beer 定律,溶液的吸光度值与其浓度成正比,故可用其吸光度值( Abso rbance) A (无量纲) 表示其浓度, 因此实验中反应速率单位为: s- 1. 将一定量底物与碱性磷酸酶混合均匀后,对溶液每隔0. 25s 测一次产物的浓度共测8 次, 对实验结果进行线性回归, 求得直线斜率k, 即在该段时间内的平均反应速率. 设2min 后的底物浓度值Sp , 由于时间间隔短,可认为k 值是底物浓度为Sp 的瞬时反应速率.改变反应初始时的底物的量,并重复以上过程四次, 可求得五组有序实数对( Sp , k) . 传统的处理过程是以1/ S 为横坐标,以 1/ v 为纵坐标作图, 得到一条直线其纵截距为 1/ Vmax, 横截距为- 1/ K m. 或者下面地址里面的可行么？ http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3050790&from=portal |
7楼2013-05-10 16:03:57
凌波丽
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【答案】应助回帖
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胖虎(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-09 20:50:38
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胖虎(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-09 20:50:38
| 贴几篇文献你现在就看吧，不明白我们在讨论。 |
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- 附件 4 : AcoupledassaymeasuringMycobacteriumtuberculosisantigen85CenzymaticactivityOriginal-AB(2009).pdf
- 附件 5 : NADH-coupledmicroplatephotometricassayforkineticstudiesofATP-hydrolyzingenzymeswithlowandhighspecificactivities-AC(2003).pdf
- 附件 6 : Science-2011-NADH-coupledmicroplatephotometricassayforkineticstudiesofATP-hydrolyzingenzymeswithlowandhighspecificactivities.pdf
- 附件 7 : Spectrophotometricdeterminationoffunctionalcharacteristicsofproteinkinaseswithcoupledenzymaticassay-FEBS(1991).pdf
- 附件 8 : Acontinuouskineticassayforadenylationenzymeactivityandinhibition-AB(2010).pdf
- 附件 9 : Ahigh-throughputcolorimetricassaytocharacterizetheenzymekineticandcellularactivity-AB(2010).pdf
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2楼2013-05-09 16:13:18
胖虎
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3楼2013-05-09 17:04:18
凌波丽
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4楼2013-05-09 21:37:11
