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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

[求助] 菌种退化

最近做实验遇到了很头疼的事,求大家帮帮忙:
本人做的是菌体转化,产物是SAM,之前做的很好底物能全部转化,而且副产物极少,可最近一个月底物能转化完但副院长产物特高,副产物为腺嘌呤和腺苷,副产物腺苷比主产物SAM还要高,想问一下,是转化后产物水解或是降解了吗?菌种用的也是原始的,做了最早的重复实验结果跟现在一样,是什么地方出了问题了呢?
向虫友们求解。不胜感激。
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希望大家多多交流。
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这怎么能一直用原始的菌种呢,你们还要不断的优选啊
2楼2013-05-06 10:21:34
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhoupeng87 at 2013-05-06 10:21:34
这怎么能一直用原始的菌种呢,你们还要不断的优选啊

不是,我是用最原始的菌种跟现用的菌种做对比(原始菌种做时腺苷的量极少的),发现原始菌种和现在所用的菌种结果是一样的。所有条件也一样。菌种放置时间才一个月,放4度冰箱保藏的(外观看斜面完好无损)。
希望大家多多交流。
3楼2013-05-06 10:37:16
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zhoupeng87

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【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2013-05-06 10:37:16
不是,我是用最原始的菌种跟现用的菌种做对比(原始菌种做时腺苷的量极少的),发现原始菌种和现在所用的菌种结果是一样的。所有条件也一样。菌种放置时间才一个月,放4度冰箱保藏的(外观看斜面完好无损)。...

你在做生产的同时还要在实验室不断的选培的
4楼2013-05-06 10:40:30
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhoupeng87 at 2013-05-06 10:40:30
你在做生产的同时还要在实验室不断的选培的...

我们这个菌之前是做过抗性筛选项的,假如再做选培的话会不会对菌的抗性有影响,或对最终的转化有影响?
希望大家多多交流。
5楼2013-05-06 11:01:37
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zhoupeng87

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【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2013-05-06 11:01:37
我们这个菌之前是做过抗性筛选项的,假如再做选培的话会不会对菌的抗性有影响,或对最终的转化有影响?...

它肯定是会变差,但是也有会不断变好的啊
6楼2013-05-06 11:35:55
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

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培养基的成分和原来都一样吗?有没有换过其中的成分? 不同厂家的原料相差挺大的
7楼2013-05-06 13:05:16
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhangyt7638 at 2013-05-06 13:05:16
培养基的成分和原来都一样吗?有没有换过其中的成分? 不同厂家的原料相差挺大的

这些都没有,所走的过程也是一模一样的,包括摇床,转速等等。
希望大家多多交流。
8楼2013-05-06 13:30:14
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luozhichen

金虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★
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张香玲1017: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢,我先试试看。我用原始菌种传代后也试了一批效果跟现在一样,假如要是菌种退化的话应该是现在的菌种出现退化吧,因为一直在传代,原始菌株是用的原来保藏的。 2013-05-07 08:35:07
laozuzunzhe: 金币+3, good! 2013-05-07 20:23:23
我做拮抗时也出现过这样的情况,刚开始拮抗效果超好,但是过一段时间就不行了,后来做了激光诱变再次筛选,效果又恢复了。有可能是你的菌种出现了退化,产物基因发生突变了,你可以尝试诱变几次,重新筛选。
有点儿小文艺的女流氓……
9楼2013-05-06 19:35:28
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jingg1990

金虫 (小有名气)

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SAM是S一腺苷蛋氨酸吗?用的是毕赤酵母基因工程菌吗?信息明确了才好分析啊。。。。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2013-05-06 20:13:08
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