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xlllh

新虫 (初入文坛)

[求助] 用UV法测中药提取物中总黄酮含量,以芦丁为对照出现的问题,请各位大侠指教!

各位大侠请帮帮忙,本人在做中药提取物中总黄酮含量,用UV法测,参照文献以芦丁为对照,试了亚硝酸钠显色法,发现显不显色对芦丁影响非常大,而我的样品几乎无影响。另外,我测定的芦丁加入显色剂后最大吸收波长与我的样品的最大吸收波长一致,为230-240nm,与文献报道的510有很大出入,不加显色剂芦丁的最大吸收波长在206nm,而且吸光度值也有很大差距,加了显色剂芦丁在最大吸收波长的吸光度值增大了至少5倍,而我的样品受显色剂的影响很小。这样我以芦丁为对照测定总黄酮含量的话,会不会偏小?是不是我不适合用芦丁作对照,各位有好的意见吗?谢谢大家了!
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xlllh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhariwei at 2013-05-07 09:30:37
紫外检测要加显色剂的,测黄酮你可以先选择好几个对照品  显色后 与样品一起进行紫外扫描  得到的图谱不仅最大吸收波长要一致  而且图形也要基本相似的,   总黄酮不一定要用芦丁做对照。

那请问拿该植物中的主要成分来做对照品可以吗?如果可行的话一定要显色吗?不显色结果差别会不会很大?
3楼2013-11-05 09:31:44
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zhariwei

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

紫外检测要加显色剂的,测黄酮你可以先选择好几个对照品  显色后 与样品一起进行紫外扫描  得到的图谱不仅最大吸收波长要一致  而且图形也要基本相似的,   总黄酮不一定要用芦丁做对照。
2楼2013-05-07 09:30:37
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