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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » 乙酰胆碱酯酶母液的配置
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想念紫叶李

木虫 (小有名气)

[求助] 乙酰胆碱酯酶母液的配置

从sigma上买的乙酰胆碱酯跟胆碱氧化酶想先配成母液，再进行分装，想知道用什么溶液配置比较合适
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1楼 2013-04-24 17:16:17
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
想念紫叶李: 金币+5, ★有帮助 2013-04-25 15:51:20
我是用的Tris盐酸缓冲液，pH 8.0。文献上也有用PBS缓冲液的，pH 7.8。根据实验室情况而定吧。我个人觉得Tris盐酸缓冲液比较好一点呢。
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想想现在，有事可做，即是幸福~
2楼2013-04-25 13:59:53
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家
引用回帖:
4楼: Originally posted by 想念紫叶李 at 2013-04-24 19:57:07
不好意思啊，我才看到你的留言。能再请教下你是否有用到胆碱氧化酶么？...

我没有用过胆碱氧化酶。应该是和乙酰胆碱酯酶一样的吧。
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想想现在，有事可做，即是幸福~
5楼2013-04-25 17:39:37
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家
引用回帖:
3楼: Originally posted by 想念紫叶李 at 2013-04-24 19:50:21
能问下你配的母液的浓度大概是多少么？sigma上买的都标注的单位是units，可是文献里好多用的都是uM为单位。...

sigma买来的如果是500u，那么你配成10u/mL的储备液，就是将买来是粉末全部定容至50mL量瓶。不用考虑重量。
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6楼2013-04-25 17:42:06
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sydney123

新虫 (小有名气)
您好楼主，麻烦请教一个问题，直接用三次水溶解乙酰胆碱酯酶，并且就水体系中可以直接用酶去水解底物吗？不加缓冲可以吗？我试验已经做了，有效果，当时没有考虑到缓冲的问题，谢谢！
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9楼2018-08-22 21:15:14
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谷云飞

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by laiyin_111 at 2013-04-25 19:42:06
sigma买来的如果是500u，那么你配成10u/mL的储备液，就是将买来是粉末全部定容至50mL量瓶。不用考虑重量。...

楼主，请问您分装后的储备液是保存在-20吗？ 冻存的储备液活性会降低吗，一般冻存几个月活性不受影响？ 我们在做的时候，遇到冻存后的储备液拿出来用时，活性降得很厉害，我们是用BPS溶解的。
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Stay hungry,Stay foolish
10楼2021-07-25 13:42:02
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普通回帖

想念紫叶李

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by laiyin_111 at 2013-04-25 13:59:53
我是用的Tris盐酸缓冲液，pH 8.0。文献上也有用PBS缓冲液的，pH 7.8。根据实验室情况而定吧。我个人觉得Tris盐酸缓冲液比较好一点呢。

能问下你配的母液的浓度大概是多少么？sigma上买的都标注的单位是units，可是文献里好多用的都是uM为单位。
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3楼2013-04-25 15:50:21
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想念紫叶李

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by laiyin_111 at 2013-04-25 13:59:53
我是用的Tris盐酸缓冲液，pH 8.0。文献上也有用PBS缓冲液的，pH 7.8。根据实验室情况而定吧。我个人觉得Tris盐酸缓冲液比较好一点呢。

不好意思啊，我才看到你的留言。能再请教下你是否有用到胆碱氧化酶么？
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4楼2013-04-25 15:57:07
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想念紫叶李

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by laiyin_111 at 2013-04-25 17:42:06
sigma买来的如果是500u，那么你配成10u/mL的储备液，就是将买来是粉末全部定容至50mL量瓶。不用考虑重量。...

谢谢你啊~
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7楼2013-04-25 18:35:27
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家
引用回帖:
7楼: Originally posted by 想念紫叶李 at 2013-04-24 22:35:27
谢谢你啊~...

不客气
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想想现在，有事可做，即是幸福~
8楼2013-04-25 18:36:50
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