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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 这是细胞凋亡吗？求助，感激不尽！
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人生初见

木虫 (小有名气)

[求助] 这是细胞凋亡吗？求助，感激不尽！

我做的药物对细胞的毒性实验，昆虫细胞。加药后，细胞出现症状，但是不是裂解，是原本贴壁的细胞变得不贴壁，还有很多小泡分泌出来，用台盼蓝有些是染不了色的，尤其是那些小泡。
我想请问各位大虾，这是细胞凋亡吗？可以用什么指标来衡量细胞凋亡或者死亡的数量，我是用显微镜直接数的，太费时，而且细胞聚集不好数，误差太大，并且很多细胞产生小泡悬浮在培养基中根本无法判断哪些是原有细胞。

不胜感激！！！！
图片control‘是空白的对照，细胞贴壁。V2LL’是加药后72小时的细胞，细胞有很多小泡，变圆。

CONTROL\'.JPG



V2LL\'.JPG
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1楼 2013-04-23 03:29:11
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hy_sandra

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 人生初见 at 2013-04-24 02:35:20
这是加药后72小时后的结果，48小时的细胞形态变化就很小，差不多IC50，随着时间的增长，对细胞的毒性增加。

请教：如何抓到IC50浓度，时间增长，细胞死亡率增加，是要固定时间点吗？ 如何找到一个参数来衡量细胞 ...

基本上一開始作就要下苦功，做不同連續稀釋?舛龋煌瑫r間，但是測細胞存活只要做簡單的MTT assay即可，抓到使細胞存活約50%的?舛燃皶r間。因為可能會有很多?舛龋詼y的時候是將細胞種在96孔盤，一個?舛扔腥馗病４_定之後，若是不想數細胞，可考慮用流式細胞儀測細胞凋亡 Annexing V-PI是測早期，TUNEL測晚期，市面上都有套組供使用。若無儀器，有測apoptosis的ELISA套組，上網查一下即可，Roche及Invitrogen都有

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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科研是無止盡的
13楼2013-04-25 21:22:46
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zhaolf

木虫 (著名写手)

胖虎爱唱歌

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-04-23 07:10:29
人生初见: 金币+1, ★有帮助 2013-04-24 07:58:57
是不是凋亡不好说,但肯定是要死了.用个apoptosis 的marker做个western就行了
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我是胖虎，我是孩子王！
2楼2013-04-23 06:04:05
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LingerMM

金虫 (小有名气)
有细胞凋亡的试剂盒，用流式可以测的
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3楼2013-04-23 09:02:29
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robocop

木虫 (著名写手)
台盼蓝没有染上？ 这不是活的么？
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纵然我扑倒在地，一颗心依然举着你.晨曦中你拔地而起，我就在你的形象里。
4楼2013-04-23 09:39:49
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