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寒小暖

禁虫 (小有名气)

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ivan.yitao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的担心是对的,最好是用不同极性的流动相测试几次,就像TLC一样,要确定是一个点,最好是用多种极性的展开剂爬几次。
Ivan
2楼2013-04-23 09:02:44
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swallow13

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
寒小暖: 金币+5, ★★★很有帮助, 您的梯度测试我不太懂,因为我对这个HPLC也不是很了解,只是想测一下纯度,可否给解释一下 2013-05-09 10:01:26
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3楼2013-04-23 12:45:36
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方解石777

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
好像流动相最好不要全部是水吧,对柱子不好,先走个梯度,乙腈从5走到80,然后看出峰的时间对应的比例,然后用这个比例走一遍,或者在这个比例附近小范围走个梯度,另外,流速什么的,都要摸一下条件才能确定。
4楼2013-04-23 16:38:57
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
水改成0.1%磷酸或其他算,pH在3左右
更改有机相比例保持出峰在15min左右。
可以比较乙腈和甲醇的区别。
5楼2013-04-24 11:17:32
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swallow13

禁虫 (正式写手)

★ ★
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-05-09 15:18:23
寒小暖(suruiqin代发): 金币+1, 谢谢您的参与 2013-10-29 07:18:30
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6楼2013-05-09 10:56:16
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


suruiqin: 金币+1, 谢谢您的参与 2013-10-29 07:18:09
降低已经比例,可以考虑加入酸性缓冲剂来调节流动相,磷酸醋酸都可以,PH最好调成偏碱性,最好7.5
7楼2013-05-09 13:23:13
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huge2007

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


寒小暖(suruiqin代发): 金币+1, 谢谢您的参与 2013-10-29 07:17:59
换成70:30不会有大的区别。
建议用乙腈(0.05%磷酸):水(0.05%磷酸)=90:10,先等度5分钟,然后20分钟梯度到10:90。看下谱图再调整流动相比例。
8楼2013-05-09 15:13:21
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syy861230

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


寒小暖(suruiqin代发): 金币+1, 感谢您的参与 2013-10-29 07:17:41
水相中可以加0.1%磷酸或者0.1%三氟乙酸或者0.01mol/L磷酸盐缓冲盐
如果检测波长不是很低的话,可改用甲醇,出峰时间会往后
调节流动相比例,还有流速,达到所楼主觉得合适的范围
与时俱进
9楼2013-05-09 16:28:28
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