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樱子莹

银虫 (小有名气)

[交流] 实验遇难题 已有5人参与

这几天我很郁闷 工作任务内容是提DNA 按理来说应该很简单 可是为什么我提的DNA量那么少 提叶子时用的量是0.2g 种子使用的一粒棉花种子 是不是我在电钻打材料的时候不够细 还是我的提取液和裂解液有问题 希望大家给点建议
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zhaolf

木虫 (著名写手)

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6楼: Originally posted by 樱子莹 at 2013-04-24 00:08:12
直接放-80呀 对了 我还想为一下 一般抽提几次呀 为什么我第二次用酚氯仿异戊醇提的时候 上面是有点颜色的 下面却是澄清的 这种现象正常吗...

我都是习惯直接放-80冻起来,等要提的时候再直接加液氮研磨。你要磨好了再冻问题应该也不大。
我都是用的kit提的,也就抽提一次吧。颜色我记不太清楚了,有点颜色也属正常,不用担心,经过后面几步就去掉了。记住抽提完保留含有DNA的水相,去掉有机相就行了。
我是胖虎,我是孩子王!
13楼2013-04-25 01:48:29
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zhaolf

木虫 (著名写手)

胖虎爱唱歌

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xy656691: 金币+5, 是的 2013-07-16 07:23:21
提的DNA量少,说明还是有DNA的。很明显,想增加产量就要增加投入啊。0.2g叶子太少就用1克啊,要选嫩的,绿的,茁壮的叶子,不要老的发黄的。电钻打材料的方法没用过,我们都是用液氮研磨,磨得很细后做接下来的操作。最后溶解DNA的时候少加点水(如果是溶解在水里的话),浓度相应就高一些。
我是胖虎,我是孩子王!
2楼2013-04-24 09:44:14
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樱子莹

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaolf at 2013-04-24 09:44:14
提的DNA量少,说明还是有DNA的。很明显,想增加产量就要增加投入啊。0.2g叶子太少就用1克啊,要选嫩的,绿的,茁壮的叶子,不要老的发黄的。电钻打材料的方法没用过,我们都是用液氮研磨,磨得很细后做接下来的操作 ...

好的 O(∩_∩)O谢谢 我还想问一下 如果是种子提DNA的话 我能提前把种子磨好 放在-80吗
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3楼2013-04-24 14:40:50
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zhaolf

木虫 (著名写手)

胖虎爱唱歌


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 樱子莹 at 2013-04-23 22:40:50
好的 O(∩_∩)O谢谢 我还想问一下 如果是种子提DNA的话 我能提前把种子磨好 放在-80吗...

干吗要磨好放-80?直接放-80就行了
我是胖虎,我是孩子王!
4楼2013-04-24 15:32:57
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